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本研究为了探索梨极矮化突变体的矮化机理,研究了生长调节物质对梨极矮化突变体生长的影响；以梨极矮化突变体及苹果梨的叶片为试材,应用RT-PCR扩增技术,克隆了GA20-氧化酶基因的编码区全长；成功构建了克隆基因的植物双元表达载体,为该基因的遗传转化奠定了基础。主要研究结果如下：梨极矮化突变体对外源赤霉素、生长素、多效唑敏感,可能属GA缺陷型。利用RT-PCR技术从梨极矮化突变体中克隆到一个GA20-氧化酶基因的全长cDNA,该序列全长1179bp,包含一个完整的编码392个氨基酸的开放阅读框(ORF),命名为PuGA20ox。氨基酸序列的多重比对表明,PuGA20ox与PcGA20-ox、 MdGA20-ox、FsGA20-ox、CiGA20-ox的同源性分别为98%、92%、81%、74%。结构分析显示,PuGA20ox编码的氨基酸序列具有典型的GA20-氧化酶特征,具有共同的保守氨基酸结构域。利用RT-PCR技术从苹果梨中克隆到一个GA20-氧化酶基因的全长cDNA,该序列全长1179bp,包含一个完整的编码392个氨基酸的ORF,命名为PbGA20ox。氨基酸序列的多重比对表明,PbGA20ox与PcGA20-ox、MdGA20-ox、FsGA20-ox、CiGA20-ox的同源性分别为99%、92%、82%、75%。结构分析显示,PbGA20ox编码的氨基酸序列具有典型的GA20-氧化酶特征,具有共同的保守氨基酸结构域。成功构建了PuGA20ox和PbGA20ox基因的植物双元表达载体,并转入到了农杆菌LBA4404菌株中,为GA20-氧化酶基因的遗传转化及其功能的研究奠定了基础。