本研究通过19种常用药物的药敏实验,发现本实验室分离保存的216株禽源大肠杆菌对链霉素的耐药率为75%。提取部分链霉素高度耐药菌株的质粒,发现菌株AE6、AA7、AE9、BA4、BE、AE2具有相似的质粒图谱且均含有一大小在23Kb大小质粒。其中BE菌株除对磷霉素和利福平敏感外,对其余药物全部耐药。且BE菌株只携带有2种质粒,除23Kb大小质粒外,另一种质粒小于2Kb。将BE株这两种质粒DNA转化DH-5α,链霉素药物平板筛选获得一链霉素抗性转化株。提取转化株质粒,以BE株的质粒溶液作参照跑电泳,发现BE株的大质粒成功转入此转化株中。转化株的药敏实验发现此质粒确实编码了链霉素的耐药特性,这些结果证明23kb的质粒与细菌链霉素耐药基因有关。根据GenBank发表的大肠杆菌链霉素耐药基因aadA1、strA及strB的序列分别设计引物,应用PCR实验技术对实验室保存的216株禽源大肠杆菌三种链霉素耐药基因进行检测,结果表明:aadA1、strA和strB的阳性率分别为49.1%,56%和65.7%。这些结果与药敏实验结果基本成正相关,但进一步比较发现,部分具有链霉素耐药基因的菌株对链霉素有敏感性,且检出率为51.8%。将相应基因测序,分析发现,AD5和AC3两菌株所携带strB耐药基因在45位点增加了一段序列GTTTCGC,在突变位点后产生了多个终止密码子,导致strB基因不能编码链霉素磷酸转移酶,证明插入突变导致了耐药菌株转变为敏感株。