心肺复苏后大鼠肝细胞损伤的实验研究

来源 :第二军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhubin19851021
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目的:研究心肺复苏后大鼠肝细胞损伤的机制及黄芪的保护作用。 方法:采用窒息(琥珀酰胆碱)合并0.5M冰氯化钾停跳液致大鼠心跳骤停,5分钟后开始心肺复苏。健康Sprague Dawley雄性大鼠42只,随机分7组:对照组(假手术组)、复苏后3小时组、复苏后6小时组、复苏后12小时组、复苏后24小时组,黄芪6小时组、黄芪24小时组,每组6只。采用酶生化法测定复苏后各组大鼠血清中ALT、AST的含量;采用放射免疫法测定各组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量;采用TUNEL标记法和透射电镜观察各组大鼠肝细胞的凋亡情况;采用免疫组化的方法观察各组大鼠肝细胞Bcl-2、Bax和NF-κB的表达情况。 结果:复苏后3小时ALT、AST高达392.1u/L±91.8u/L、367.5u/L±226.0u/L;复苏后各组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量明显高于对照组(P<0.05),而黄芪组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量低于相应复苏组(P<0.05);假手术组肝细胞凋亡较少发生,TUNEL阳性率为3.12%±0.56%,复苏后3小时、6小时、12小时、24小时肝细胞TUNEL阳性率分别为35.74%±2.3596、56.63%±3.41%、44.58%±2.98%、47.53%±2.15%,6小时黄芪组和24小时黄芪组TUNEL阳性率为38.26%±3.02%、28.56%±2.31%;电镜下各组大鼠肝细胞均有细胞缩小和变形、细胞质和核染色质发生浓缩、胞浆内糖原颗粒减少或消失、线粒体肿胀、内质网扩张、凋亡小体形成等凋亡表现,但以复苏后6小时最为明显,黄芪组相对较轻;复苏后3小时肝细胞抑凋亡蛋白Bcl-2无明显表达,6小时阳性表达率为57.79%±8.35%,24小时最高80.32%±9.41%;复苏后3小时促凋亡蛋白Bax阳性表达率高达34.79%±1.12%,6小时为28.05%±2.34%;对照组肝细胞NF-κB的阳性表达率仅为6.17%,复苏后3小时最高69.73%±7.53%,复苏后24小时29.8%±3.56%;黄芪组Bcl-2、NF-κB的阳性表达高于相应复苏组,而Bax的阳性表达低于相应复苏组。★常二早压大麟研充婆爷要论丈 结论:心肺复苏后大鼠存在肝细胞损伤;肝细胞凋亡可能是心肺复苏后大鼠肝细胞损伤的主要机制之一,其中Bcl一2瓜ax比例失衡、NF一出的激活可能在肝细胞凋亡的调节中起重要作用;黄茂通过降低Bax的表达、增加Bcl一2的表达来抑制肝细胞的凋亡。
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