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病原微生物感染性疾病一直以来都是临床中较为严重和常见的问题,随着各种临床耐药株的出现,这些问题变得越来越严重,而传统的抗生素已经不能非常有效的解决这一类问题。抗菌肽--一类广泛分布在各个物种中的多肽,不但能强有力的抗菌作用,而且不易使得细菌产生耐药性,这使我们在解决这一类问题中看到了曙光,抗菌肽已经成为新一代抗菌药物设计的模板分子。两栖类动物皮肤分泌物中含有数量庞大的包括抗菌肽在内的活性蛋白多肽,通过基因组学和蛋白质组学的研究手段,许多抗菌肽已经在两栖类动物皮肤中得以鉴定。本文通过cDNA克隆,从单个云南臭蛙(Odorrana andersonii)的皮肤中得到了596个编码抗菌肽的cDNA序列,这些cDNA一共编码175个不同的抗菌肽分子,其中13个和已报道的其它两栖类动物皮肤来源的抗菌肽相同,剩余的162个抗菌肽结构为首次发现。这些抗菌肽一共可以分为51个家族,其中被我们命名为Andersonins的23个家族为首次报道命名。通过蛋白质组学研究手段,包括Sephadex G-75、Resource S阳离子交换、RP-HPLC分离纯化手段、MALDI-TOF分子量测定手段,在云南臭蛙的皮肤分泌物中,31个家族共计65条抗菌肽的理论分子量和观测到的分子量相吻合,其中35个组分的纯度较好。我们合成了10条抗菌肽,结果揭示这些合成的抗菌肽对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌具有抗菌作用,而且溶血活性极低,另外这些抗菌肽还具有肥大细胞脱粒活性,在这些合成的抗菌肽之间我们还发现了联合杀菌作用。根据目前的文献资料,云南臭蛙皮肤中的抗菌肽种类和数量很可能是世界上最为丰富的,占了全部抗菌肽的10.44％,占两栖类皮肤来源的30.43％。通过进化分析揭示达尔文正选择压力是云南臭蛙皮肤产生如此高丰度抗菌肽的根本因为。本文的研究为新一代抗菌肽药物开发提供了数量庞大的模板,对我国抗菌肽药物先导分子的自主知识产权有重要意义。