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目的:探讨磷酯酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶/内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)信号通路在氢吗啡酮(Hydromophine)后处理减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用,为心脏缺血再灌注保护提供理论依据。方法:将健康雄性SD大鼠50只,体重250320g,随机分为5组(n=10只):(1)对照组(C组):平衡灌注120min,不予其它处理;(2)缺血再灌注组(I/R组):平衡灌注30min,予以缺血30min,再灌注60min处理;(3)氢吗啡酮后处理组(H组):平衡灌注30min,然后缺血30min,再灌注前10min用含有0.3μmol/L氢吗啡酮的K-H液灌注进行后处理,最后平衡灌注50min;(4)氢吗啡酮后处理+PI3K抑制剂组(HL组):平衡灌注30min,然后缺血30min,再灌注前10min用含有0.3μmol/L氢吗啡酮和15μmol/L LY294002的K-H液灌注进行后处理,最后平衡灌注50min;(5)PI3K抑制剂(L组):平衡灌注30min,然后缺血30min,再灌注前10min用含15μmol/L LY294002的K-H液灌注进行后处理,最后平衡灌注50min。观察指标:(1)在灌注过程中实时监测大鼠心脏的心功能指标,包括心率(HR)、左室的收缩压(LVSP)和舒张末压(LVEDP),左心室内压最大上升速率和最大下降速率。通过控制K-H液的流速调整心脏功能状态,并分别于平衡灌注30分钟末(T0)m、再灌注之后的10分钟(T1)、30分钟(T2)和60分钟(T3)时,记录心脏心率(HR)、左室发展压(LVDP)和左心室压力最大上升及下降速率(±dp/dtmax),并计算出大鼠心脏RPP值和左心室压力最大上升及下降速率恢复值。(2)于T3时取心脏采用硝化还原法测各组心肌组织中NO含量,采用TTC染色法测定心肌梗死面积(AN/ARR)。(3)于T3时取心脏采用Western blot方法,GAPDH为内参,测定左心室心肌组织Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS的蛋白表达水平。结果:与C组比较,其它4组大鼠T2、T3时RPP值降低,左心室内压上升及下降速率恢复值下降,心梗面积下降,心肌组织NO含量下降(P<0.05),I/R组心肌组织p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS蛋白表达增加(P<0.05);与I/R组比较,H组大鼠T2、T3时心脏RPP值升高和左心室上升速率和下降速率恢复值明显升高,心肌组织NO含量(139.31±10.17)μmol/L升高,心梗面积(37.5±3.41)%减少,心肌组织p-Akt/Akt(0.67±0.12)和p-eNOS/eNOS(0.71±0.15)表达上升,各组差异均具有统计学意义(P<0.05);与H组比较,HL组大鼠T2、T3时RPP值降低,左心室内压上升及下降速率恢复值下降,心肌组织NO含量(125.89±15.10)μmol/L减少,心梗面积(43.5±5.62)%增加,心肌组织p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS分别为(0.53±0.14)、(0.62±0.16),表达均下降,差异具有统计学意义(P<0.05);与HL组比较,L组大鼠T2、T3时RPP值降低,左心室内压上升及下降速率恢复值下降,心肌组织NO含量下降,心梗面积增加,心肌组织p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS表达下降,各组差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:经氢吗啡酮后降低大鼠心肌缺血再灌注损伤的机理可能与激活P13K-Akt-eNOS信号通路,增加内源性NO释放有关。