陕西省猕猴桃病毒种类的鉴定及分子变异研究

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猕猴桃(Actinidia)是世界上重要的经济作物。2017年中国猕猴桃种植面积16.6万hm~2,产量202.5万吨,种植面积和产量均位居世界第一。陕西省是我国最大的猕猴桃生产地,2017年猕猴桃种植面积6.9万hm~2,产量达到138.9万吨,超过全国总产量的50%。近年来,新西兰、意大利和我国湖北省猕猴桃产区不断有猕猴桃病毒病害发生的报道,而陕西省猕猴桃产量和种植面积均位居全国第一,但病毒病的相关研究却较少。为明确陕西省猕猴桃主产地的猕猴桃病毒种类、发生率及病毒的分子变异情况,2017—2018年,采集了陕西省眉县、周至、杨凌、汉中等地疑似感染病毒的猕猴桃样品440份,采用RT-PCR结合Dot-ELISA的方法鉴定猕猴桃病毒,统计苗木带毒率;克隆病毒外壳蛋白(Coat protein,CP)的核苷酸序列,分析其分子变异情况。研究结果如下:1.共鉴定了病毒6种,分别是猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,Ac VA),猕猴桃病毒B(Actinidia virus B,Ac VB),猕猴桃褪绿环斑相关病毒(Actinidia chlorotic ringspot-associated virus,Ac CRa V),黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV),苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV),马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)。据我们所知,这是首次报道PVX侵染猕猴桃。首次在陕西省猕猴桃上检测到CMV和PVX。2.统计了这6种病毒的苗木样品带毒率,单一病毒侵染的情况中最高的是Ac CRa V为41.6%,最低的是CMV为21.1%。不同病毒在不同地区的带毒率不同,在眉县Ac CRa V和ASGV的带毒率最高,分别为43.5%和42.4%;在周至Ac VA和Ac VB的带毒率最高,分别为56.7%和52.5%;在杨凌Ac VA和Ac VB的带毒率最高,分别为85.7%和71.4%;在汉中Ac CRa V的带毒率最高,为70.0%。大多数的猕猴桃病毒侵染植株时表现为复合侵染,在不同的侵染组合中,Ac VA+Ac VB最为常见,在样品中的带毒率达到22.3%。3.系统进化发育结果表明Ac VA、Ac VB和Ac CRa V的序列均聚合在I组和II组,其分子变异均较大;ASGV,CMV,PVX的序列均聚合在同一组,其分子变异较小。
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