背景：尼克酰胺-N-甲基化酶(NNMT, EC2.1.1.1)是S—腺苷—L蛋氨酸(SAM)依赖的胞质酶,正常表达于人肝脏组织中,其主要的生理功能为催化尼克酰胺和吡啶类物质的甲基化反应,形成吡啶盐。早期的一些研究发现其在帕金森症患者的脑组织及脑脊液中有异常表达,而近来研究发现,其与多种肿瘤关系密切,在肾透明细胞癌、甲状腺乳头状癌、口腔鳞癌、结直肠癌等多种肿瘤组织中存在高表达,但NNMT在肿瘤细胞中过表达的意义或作用机制有待细胞或动物水平实验进行研究。目的：研究NNMT对肿瘤细胞增殖的影响,为肿瘤治疗寻找新的潜在靶点。方法：应用分子克隆技术构建NNMT基因RNAi慢病毒载体NNMT-RNAi-LV(1#、3#、4#)及对照载体pSG FU-RNAi-NC-LV,并感染人结肠癌HT-29细胞。采用Real-Time PCR和Western blot分别检测NNMT干扰前后mRNA和蛋白水平的表达, MTT法分析NNMT对肿瘤细胞增殖的影响、流式细胞术分析细胞周期和凋亡变化、平板克隆形成试验和裸鼠移植瘤成瘤实验分析细胞致瘤性变化。结果：NNMT基因RNAi慢病毒载体可显著下调HT-29细胞中NNMT基因mRNA和蛋白的表达,沉默NNMT表达后细胞生长曲线右移、细胞周期表现为G0/G1期阻滞,细胞早期凋亡增加、平板克隆形成率显著降低、裸鼠体内细胞致瘤性降低。结论：利用shRNA介导的RNAi技术可有效沉默HT-29细胞中NNMT的表达。NNMT表达下调可有效抑制肿瘤细胞的增殖,这为以NNMT作为靶点治疗该类肿瘤提供了理论依据。