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目的1.探讨视神经脊髓炎(Neuromyelitis optica,NMO)患者外周血单个核细胞(peripheral blood monocaryon cell,PBMC)Bcl-2基因的表达水平与此疾病复发之间的相关性;2.进一步探讨视神经脊髓炎患者复发的时限与患者外周血单个核细胞Bcl-2基因表达水平之间的相关性。方法1.选择确诊的视神经脊髓炎患者25例,分为复发组及未复发组。其中复发组14例,未复发组11例。2.分别取复发组和未复发组患者的新鲜外周静脉血5ml,应用Ficoll密度-梯度离心法分离其外周血单个核细胞。3.以分离后的外周血单个核细胞为材料,应用TRIzol法提取细胞内的mRNA。4.以提取的mRNA为模板,应用两步法反转录-聚合酶链反应(reversetranscription-PCR,RT-PCR)技术,首先将mRNA反转录为cDNA,继而以cDNA为模板,以Bcl-2为目的基因及GAPDH为内参对照,分别经其引物扩增。5.扩增后产物经嗅化乙啶(Ethidium bromide,EB)染色,1%琼脂糖凝胶电泳后观察,应用凝胶成像分析仪摄片。6.以同一样本Bcl-2基因与GAPDH基因的灰度比作为统计数据,主要应用QUANTITY ONE软件处理试验图片得出数据,经GENE TOOLS软件验证性处理图片得出数据,并选择适当的统计学方法,应用SPSS软件对所得数据进行统计学分析。结果1.复发组与未复发组患者的一般资料比较,其年龄差异(t=0.216,P>0.05)、性别差异(x~2=0.365,P>0.05)、发病次数差异(t=0.275,P>0.05)均无统计学意义。2.复发组与未复发组患者外周血单个核细胞Bcl-2基因表达水平之间的差异有显著统计学意义(t=6.096,P<0.001)。3.复发组患者依据发病时间分为<2天、2-4天、4-6天、≥6天组别,各组间患者外周血单个核细胞Bcl-2基因表达水平之间的差异有显著统计学意义(F=70.880,P<0.001)。4.各组间比较,复发后发病小于2天的患者与发病大于等于2天(包括2-4天组、4-6天组及≥6天组)的患者Bcl-2基因表达水平之间的差异均有显著统计学意义(均P<0.001)。2-4天组与4-6天组相比,尚不能认为其差异有统计学意义(t=1.819,P>0.05);但与≥6天组相比则差距有显著统计学意义(t=5.085,P<0.01)。4-6天组与≥6天组的Bcl-2/GAPDH灰度比差异无统计学意义(t=2.766,P>0.05)。5.分别应用QUANTITY ONE及GENE TOOLS软件处理试验图片。处理后所得数据经SPSS软件进行分析后得到相同的统计学结果。以上所有结果以QUANTITY ONE软件处理的数据为例进行说明。结论1.视神经脊髓炎患者复发时可检测到外周血单个核细胞Bcl-2基因较未复发患者表达增强,可以认为视神经脊髓炎的复发与患者外周血单个核细胞Bcl-2基因的表达水平具有相关性。2.视神经脊髓炎患者复发时外周血单个核细胞Bcl-2基因表达增强的程度与发病时限存在相关性。其增强程度在发病初期更为明显,随着发病时间的延长而呈现逐渐减弱趋势。