DEAD-box RNA解旋酶在RNA的新陈代谢过程中起着重要作用,从RNA的合成到RNA的降解都需要它的存在,同时它对植物的生长发育和抗逆反应中起调控作用。克隆鉴定了一个水稻DEAD盒RNA解旋酶基因OsBIRH1。OsBIRH1基因全长cDNA为2167bp,包含一个1926bp的开放阅读框,编码一个641个氨基酸组成的蛋白,预测分子量为70.8kD。OsBIRH1基因位于水稻第3号染色体上,由8个外显子和7个内含子组成。预测的OsBIRH1蛋白包含DEAD盒解旋酶所特有的保守DEAD和HELICc结构域以及保守模体结构。系统进化树分析表明,OsBIRH1与拟南芥和人DEAD盒解旋酶有很高的同源性,氨基酸序列的一致性达到47%～54%。 为了研究水稻OsBIRH1蛋白的生化特性,我们将OsBIRH1的编码序列克隆到原核表达载体pRSET-A中,并纯化了重组OsBIRH1蛋白。携带有pRSETa-OsBIRH1质粒的细菌经IPTG诱导,用Ni-NTA His Bind树脂从包含体中纯化获得重组的OsBIRH1蛋白。SDS-PAGE电泳分析表明,重组OsBIRH1蛋白大小约为～75kDa,与其预测的分子量基本一致。 为了研究水稻OsBIRH1在抗病反应中的可能作用,我们构建了OsBIRH1的转基因双元载体,并用浸花法转化拟南芥。目前已经获得转基因种子,筛选和转基因植株的鉴定正在进行中。