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本文通过体外新生牛肝细胞的单层培养，采用竞争PCR法检测不同浓度的胰岛素、高血糖素对胰岛素样生长因子-Ⅰ的mRNA丰度的影响，同时探讨了胰岛素、高血糖素和胰岛素样生长因子-Ⅰ对肝脏糖异生关键酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)mRNA丰度的影响。在实验中，首先成功的对目的基因(PEPCK、IGF-Ⅰ、β-actin)进行了克隆、PCR条件优化并测序，测序结果与Genbank报道一致。在原代单层培养的新生牛肝细胞中添加Insulin(INS)、Glucagon(GN)、IGF-Ⅰ(Insulin-like growth factor Ⅰ)，待培养12h后，通过竞争PCR法检测IGF-Ⅰ mRNA和PEPCKmRNA的变化规律。培养液中的各细胞因子的添加终浓度为：INS(0nmol／ml、1nmol／ml、10nmol／ml、100nmol／ml、1000nmol／ml)，GN(0pg／ml、1pg／ml、20pg／ml、100pg／ml、500pg／ml)，IGF-Ⅰ(0ng／ml、1ng／ml、10ng／ml、15ng／ml、20ng／ml、30ng／ml、40ng／ml、50ng／ml、60ng／ml、100ng／ml、150ng／ml)。实验结果：随INS的浓度的增加，IGF-Ⅰ的mRNA的丰度成上升趋势，高浓度没有抑制其表达，各浓度梯度之间存在显著性差异(P＜0.01)；随GN的浓度升高，IGF-Ⅰ的mRNA的丰度成下降趋势，实验组IGF-Ⅰ的mRNA的表达量低于对照组，除低浓度组外的各实验组与对照组之间相比差异显著；同时，随IGF-Ⅰ的浓度的升高，PEPCKmRNA的丰度呈下降趋势；随INS的浓度升高，PEPCKmRNA的表达也成下降趋势，且在中等浓度(10-100nmol／ml)，PEPCK的mRNA的下降速度最快，各浓度梯度之间差异极显著；随GN的添加浓度的升高，PEPCKmRNA的表达成明显的上升趋势，实验组较对照组的肝细胞mRNA表达水平高，各浓度之间差异较显著(P＜0.01)，且在高浓度(100-500pg／ml)，上升的速度趋于平缓。 上述结果表明，高血糖素、胰岛素、胰岛素样生长因子-Ⅰ共同参与了血糖代谢紊乱引起的奶牛酮病脂肪的调控。胰岛素和胰岛素样生长因子-Ⅰ呈正相关，高血糖素与胰岛素样生长因子-Ⅰ呈负相关。高血糖素通过上调PEPCKmRNA的表