双向凝胶电泳筛选子宫内膜癌淋巴转移相关蛋白质

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目的:运用双向凝胶电泳筛选并质谱分析鉴定子宫内膜癌淋巴转移的相关蛋白质,寻找子宫内膜癌淋巴转移的相关蛋白质,从蛋白水平探索子宫内膜癌淋巴转移相关因素,为治疗个体化提供理论依据。方法:提取正常子宫内膜、淋巴结阴性和淋巴结阳性的子宫内膜癌各4例,共12例子宫内膜组织总蛋白后,用双向凝胶电泳分3组进行蛋白质分离,Pdquest软件(Pdquest version7.0)分析双向电泳凝胶扫描数字化图像,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS (4700 Proteomics Analyzer )对差异蛋白点进行分析,并根据肽质量指纹图谱在NCBI数据库中查询。结果:获得重复性较好的淋巴结阳性、阴性子宫内膜癌和正常子宫内膜双向凝胶电泳图谱。在凝胶图上筛选出在淋巴结阳性子宫内膜癌中高表达5倍以上的差异蛋白点9个,低表达5倍以上的差异蛋白点2个。对差异蛋白点的鉴定结果显示,与子宫内膜癌淋巴转移相关的蛋白质中,高表达蛋白质有:热休克蛋白27、肌动蛋白、S100钙结合蛋白A9、丙酮酸激酶、α烯醇化酶、白蛋白和组氨酸三聚体核苷结合蛋白1,低表达的蛋白质有:天冬酰胺酶样1蛋白和酯酶D/甲酰-谷胱甘肽水解酶。结论:淋巴结阳性和阴性子宫内膜癌的双向凝胶电泳图谱之间存在较明显的差异。经鉴定的9种蛋白质可能在子宫内膜癌发生淋巴转移过程中发挥作用。双向凝胶电泳可以比较淋巴结阳性和阴性子宫内膜癌之间蛋白质表达谱的差异,结合质谱分析,可以识别和鉴定这些差异表达的蛋白质。
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