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目的研究N-乙酰基-丝氨酸-天门冬氨酰-赖氨酸-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyllysyl-proline,Ac-SDKP)是否能够通过活化c AMP依赖性蛋白激酶(protein kinase A,PKA)信号抑制血管紧张素(angiotensin,Ang)II/ROCK(Rho-associated coiled-coil-forming protien kinase)介导的矽肺肌成纤维细胞分化,进而发挥抗矽肺纤维化的作用。方法构建矽肺大鼠动物模型,并予以Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗,通过免疫荧光染色法观察肺组织内PKA蛋白、α-平滑肌激动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达与分布,western blot法检测PKA、ROCK、p-MBS、α-SMA、I型胶原蛋白的表达。MRC-5人胚肺成纤维细胞培养实验中采用Ang II诱导人胚肺成纤维细胞(MRC-5),并予以Ac-SDKP、Valsartan、Y-27632、6-Bnzc AMP预处理,通过免疫荧光染色法观察PKA、α-SMA的表达与定位,western blot法检测PKA、ROCK、p-MBS、α-SMA、I型胶原蛋白的表达。用SPSS17.0软件进行统计学分析,P<0.05为差异具有统计学意义。结果在矽肺动物模型组中,免疫荧光化学染色可见α-SMA在矽肺组高表达,而PKA则是低表达。western blot法检测矽肺4周、8周组中PKA蛋白表达下调,分别是对照4周、8周组的12.50%和10.25%,给予Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗后则能够显著上调PKA蛋白表达,分别是矽肺8周组的3.50倍和4.62倍。而ROCK、P-MBS、α-SMA、I型胶原蛋白表达则正好相反。矽肺4周、8周组ROCK蛋白表达是对照4周、8周组的3.82倍和3.62倍,给予Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗后ROCK蛋白表达明显下调,分别是矽肺8周组的21.83%和22.98%;P-MBS蛋白表达在矽肺4周、8周组中表达明显上调,分别是对照4周、8周组的3.07倍和2.78倍,给予Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗后p-MBS蛋白表达明显下调,分别是矽肺8周组的48.31%和50.56%;α-SMA蛋白在矽肺4周、8周组表达上调,分别是对照4周、8周组的6.26倍和4.05倍,给予AcSDKP抗纤维化治疗或预防治疗后,α-SMA蛋白表达分别是矽肺8周组的43.20%和28.39%;I型胶原蛋白在矽肺4周、8周组明显上调,分别是对照4周、8周组的6.88倍和5.53倍,给予Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗后I型胶原表达明显下调,分别是矽肺8周组的52.77%和65.27%;差异均有统计学意义(P<0.05)。体外细胞培养实验中,给予Ang II诱导MRC-5细胞,Ang II能够刺激MRC-5细胞表达α-SMA和I型胶原蛋白,并呈现出一定的时间依赖效应。免疫荧光染色显示,给予Ang II诱导后PKA表达则较对照组明显减弱,而α-SMA蛋白表达显著增强。同时western blot检测结果显示:给予Ang II刺激诱导后PKA蛋白表达明显下调,是对照组的21.13%,当给予Ac-SDKP、Valsartan或Y-27632预处理后PKA蛋白显著增高,分别是Ang II组的5.23倍、5.96倍、3.30倍,予以PKA激活剂6-Bnz-c AMP诱导后,呈现出和Ac-SDKP相同的表达结果,是Ang II刺激组的3.88倍。给予Ang II诱导后,ROCK、p-MBS、α-SMA、I型胶原蛋白表达均上调,其中,Ang II刺激组中ROCK蛋白表达是对照组的2.46倍,当给予AcSDKP、Valsartan、Y-27632或PKA激活剂6-Bnz-c AMP预处理后,ROCK蛋白表达明显降低,分别是Ang II刺激组的46.87%、52.50%、56.87%、51.87%;Ang II刺激组的p-MBS蛋白是对照组的3.02倍,当给予Ac-SDKP、Valsartan、Y-27632或PKA激活剂6-Bnz-c AMP预处理后,p-MBS蛋白表达明显降低,分别是Ang II刺激组的31.12%、24.50%、21.19%、19.86%;Ang II刺激组α-SMA蛋白表达较对照组明显增高,是对照组的2.67倍,当给予Ac-SDKP、Valsartan、Y-27632或PKA激活剂6-Bnz-c AMP预处理后,α-SMA蛋白表达明显降低,分别是Ang II刺激组的39.66%、27.37%、44.13%、22.90%;Ang II刺激组I型胶原蛋白表达,是对照组的4.02倍,当给予Ac-SDKP、Valsartan、Y-27632或PKA激活剂6-Bnzc AMP预处理后,I型胶原表达明显降低,分别是Ang II刺激组的45.22%、36.94%、43.94%、45.85%;差异均有统计学意义(P<0.05)。以上结果表明AcSDKP能够通过对PKA表达的上调,抑制Ang II介导的ROCK信号通路,进而阻抑肌成纤维细胞的分化。结论Ac-SDKP能够通过对PKA和ROCK信号交互作用的调节,抑制Ang II诱导的肌成纤维细胞的分化,从而发挥抗矽肺纤维化的作用。