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研究目的:在癌毒病机理论的指导下,收集临床资料,分析大肠癌发病的相关因素及其与中医证候的关系,总结大肠癌发病的一般情况及中医证候分布特点及规律;通过血浆外泌体piRNA测序对不同中医证候的大肠癌患者及健康志愿者进行piRNA表达分析,筛选差异表达piRNA,探索大肠癌中医证候诊断的特异性生物标志物,为中医辨证提供客观依据,丰富癌毒病机理论辨治大肠癌的科学内涵。研究方法:采用横断面研究方法调查2020年12月至2021年12月期间于江苏省中医院肿瘤外科、普外科、肛肠科住院的符合诊断及纳排标准的大肠癌患者300例,收集患者临床资料,填写《大肠癌中医证候调查表》,对其进行中医辨证分型,最后建立数据库,运用SPSS 25.0对数据进行统计整理,总结大肠癌中医证候的分布特点及规律,探讨大肠癌中医证候与临床相关因素之间的关系。同时选取临床研究中辨证为湿热毒蕴证、瘀毒内阻证、湿热瘀毒证、脾气亏虚证的大肠癌患者及健康志愿者,采集外周血提取血浆外泌体,用高通量测序方法对各组外泌体进行piRNA表达分析,筛选出差异表达piRNA。研究结果:1.本次研究纳入的300例大肠癌患者中,男性患者181例,女性患者119例,男女比例约为1.52:1。患者年龄分布区间为31-90岁,平均年龄为63.78±11.95岁,年龄段在64-74岁的患者最多,占总人数的44.7%,45岁以上的中老年患者占总人数的94.3%。既往有高血压病史的患者占总人数的40.7%,有糖尿病病史的患者占总人数的14.3%,有冠心病病史的患者占总人数的6.0%,有结直肠腺瘤病史的患者占总人数的1.3%,有肿瘤家族史的患者占总人数的7.7%,有吸烟史的患者占总人数的37.7%,有饮酒史的患者占总人数的40.7%。患者术后病理分期以Ⅱ期、Ⅲ期为主,分别占总人数的40.7%、42.0%。直肠为最常见的发病部位,占总人数的45.0%。病理类型以腺癌（97.7%）为主,分化程度集中在中分化（73.0%）。2.大肠癌患者的中医证候分布按频率由高到低依次为:湿热瘀毒证（32.7%）＞湿热毒蕴证（32.0%）＞瘀毒内阻证（17.7%）＞脾气亏虚证（12.3%）＞脾肾两虚证（5.3%）。大肠癌中医证候与年龄（P=0.074＞0.05）、BMI（P=0.259＞0.05）、高血压（P=0.744＞0.05）、糖尿病（P=0.507＞0.05）、冠心病（P=0.954＞0.05）、结直肠腺瘤（P=0.063＞0.05）、肿瘤家族史（P=0.126＞0.05）、吸烟史（P=0.187＞0.05）、发病部位（P=0.178＞0.05）、分化程度（P=0.995＞0.05）之间无明显相关性;而与病理分期（P=0.000＜0.05）、性别（P=0.011＜0.05）、饮酒史（P=0.003,P＜0.05）之间有明显相关性。其中,0-Ⅱ期与湿热毒蕴证（P=0.000＜0.05）、瘀毒内阻证（P=0.000＜0.05）相关,Ⅲ-Ⅳ期与湿热瘀毒证（P=0.000＜0.05）、脾气亏虚证（P=0.031＜0.05）及脾肾两虚证（P=0.001＜0.05）有一定联系。0-Ⅱ期大肠癌患者中湿热毒蕴证和瘀毒内阻证比例较高,Ⅲ-Ⅳ期大肠癌患者中湿热瘀毒证、脾气亏虚证及脾肾两虚证比例较高。男性患者较女性患者而言,瘀毒内阻证（P=0.020＜0.05）及湿热瘀毒证（P=0.000＜0.05）比例较高。饮酒史与湿热瘀毒证（P=0.022＜0.05）、脾气亏虚证（P=0.004＜0.05）之间有一定联系。有饮酒史的患者中湿热瘀毒证比例较高,而脾气亏虚证比例较低。3.对大肠癌不同证候进行piRNA差异表达分析,在设定的阈值条件下（pValue＜0.05且|log2FoldChange|＞1）,湿热毒蕴证与健康对照组比较,筛选出显著差异表达piRNA54条,其中22条表达显著上调,32条表达显著下调。瘀毒内阻证与健康对照组比较,筛选出显著差异表达piRNA80条,其中21条表达显著上调,59条表达显著下调。湿热瘀毒证与健康对照组比较,筛选出显著差异表达piRNA58条,其中16条表达显著上调,42条表达显著下调。脾气亏虚证与健康对照组比较,筛选出显著差异表达piRNA52条,其中17条表达显著上调,35条表达显著下调。湿热毒蕴证与瘀毒内阻证比较,筛选出显著差异表达piRNA56条,其中43条表达显著上调,13条表达显著下调。湿热毒蕴证与湿热瘀毒证比较,筛选出显著差异表达piRNA28条,其中20条表达显著上调,8条表达显著下调。湿热毒蕴证与脾气亏虚证比较,筛选出显著差异表达piRNA30条,其中22条表达显著上调,8条表达显著下调。湿热瘀毒证与瘀毒内阻证比较,筛选出显著差异表达piRNA38条,其中22条表达显著上调,16条表达显著下调。湿热瘀毒证与脾气亏虚证比较,筛选出显著差异表达piRNA27条,其中15条表达显著上调,12条表达显著下调。瘀毒内阻证与脾气亏虚证比较,筛选出显著差异表达piRNA35条,其中11条表达显著上调,24条表达显著下调。研究结论:1.大肠癌的发病率普遍男性多于女性,以中老年患者最为常见,有高血压、吸烟、饮酒史的患者占有一定比重。术后病理分期以Ⅱ、Ⅲ期为主,直肠为最常见的发病部位,病理类型以腺癌多见,分化程度主要集中在中分化。2.大肠癌患者中医证候实性证候多于虚性证候,湿热瘀毒证最多,其次为湿热毒蕴证、瘀毒内阻证、脾气亏虚证、脾肾两虚证。大肠癌患者中医证候分布与年龄、BMI、高血压、糖尿病、冠心病、结直肠腺瘤、肿瘤家族史、吸烟史、发病部位、分化程度无明显相关性,而与病理分期、性别、饮酒史具有明显相关性。0-Ⅱ期大肠癌患者以湿热毒蕴证和瘀毒内阻证多见,Ⅲ-Ⅳ期大肠癌患者以湿热瘀毒证、脾气亏虚证及脾肾两虚证多见。大肠癌男性患者相较于女性患者,湿热瘀毒证、瘀毒内阻证多见。相较于无饮酒史患者而言,大肠癌有饮酒史患者以湿热瘀毒证多见。3.对大肠癌患者血浆外泌体进行piRNA差异表达筛选,大肠癌湿热毒蕴证、瘀毒内阻证、湿热瘀毒证、脾气亏虚证与健康对照组比较均存在显著差异表达piRNA,这些piRNA有望成为证候诊断的特异性生物标志物;此外,大肠癌不同证候间也存在显著差异piRNA,这些piRNA可能成为区别大肠癌不同证候的特异性生物标志物。