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目的:研究土家族药物三百棒醇提物通过TLR4/NF-κB信号通路调控胶原诱导型关节炎CIA大鼠滑膜增殖的作用机制。方法:1.随机选择70只SD大鼠中的10只作为正常组,其余用于建立CIA模型。在大鼠的右后足,尾巴皮内注射0.3ml每种乳剂,阴性对照组在相同部位注射相同体积的生理盐水。7d之后重复上述步骤。在第二次免疫14d后,观察到脚趾肿胀和免疫组的关节炎指数显着增加,并且随机抽取三只已正常造模大鼠,取膝关节滑膜组织切片行病理学观察,HE染色的滑膜增厚,炎性细胞浸润多,以及AI评分≥4表明该模型已成功构建。经过14d的二次免疫,成功建立了CIA模型,并通过分层随机化将AI值得分分为模型组,三百棒乙醇提取高,中,低剂量组和阳性对照组（甲氨蝶呤组）。三百棒醇提物组:参考60kg成人临床常用剂量折算成等效标准大鼠剂量。低、中、高分别为1:2:4即1.2、2.4、4.8g/kg,每日一次,连续灌胃35d。阳性对照组:甲氨蝶呤给药剂量参考60 kg成人临床常用剂量510mg·kg-1·d-1折算成大鼠剂量0.001g·kg-1·d-1,每日一次,连续灌胃35 d。正常组和模型组:每天一次施用相同体积的生理盐水,持续35d。2.HE观察大鼠滑膜组织病理变化情况。将固定好的滑膜组织放入石蜡包埋盒中,标注时间及组别,室温下、置于95%乙醇脱水过夜,选择合适厚度的石蜡切片并将其放在载玻片上。在光学显微镜下观察关节滑膜细胞和血管的增生、滑膜层及滑膜下层淋巴细胞的浸润等情况。3.采用ELISA检测大鼠灌药4W后血清TNF-α、IL-1β水平。4.采用Western blot检测NF-κBp65、MyD88、IRAK-1、TLR4在滑膜组织中的蛋白表达。5.采用RT-PCR检测NF-κBp65、MyD88、IRAK-1、TLR4在滑膜组织中的mRNA表达量。结果:1.一般情况:正常组大鼠状态良好,饮水正常,体重稳定,爪甲呈白色,关节运动自由。模型组大鼠皮毛颜色暗淡枯槁,伴有脱落,活动摄食减少,踝关节和足跖关节肿胀变形,部分大鼠足面破溃跛行,小便量增多,大便稀溏,体质量增长减慢甚至减轻。每个剂量组均关节肿胀程度降低,食物摄入量略有增加,体重逐渐增加。其中,三百棒醇提物高剂量组优于其他药物治疗组（P<0.05）。2.关节肿胀度:用药后第1周模型组大鼠关节肿胀度造模后呈上升趋势,与正常组比较（P<0.05）;第3周给药组大鼠关节肿胀度较模型组显著降低（P<0.05）;实验第4周,三百棒中、高剂量组大鼠关节肿胀度较模型组显著降低（P<0.05）,治疗有明显改善。3.HE染色情况:正常组膝关节滑膜组织正常,细胞排列整齐,无充血水肿,淋巴细胞、单核细胞等炎性细胞未见浸润,滑膜细胞无增生;模型组可见滑膜组织充血水肿,滑膜细胞大量增生、排列紊乱,纤维组织渗出;三百棒醇提物高剂量组滑膜细胞增生明显减轻,滑膜组织有轻度充血水肿;三百棒醇提物中剂量组滑膜细胞增生稍有减轻,滑膜组织有少量充血水肿;三百棒醇提物低剂量组滑膜细胞增生略有减轻,滑膜组织有大量充血水肿;甲氨蝶呤组滑膜细胞排列相对规则,组织轻度充血水肿,少量炎性细胞浸润,增生情况有所控制。4.ELISA:与模型组比较,治疗组血清中TNF-α、IL-1β含量明显降低（P<0.05）;与MTX组比较,三百棒醇提物高剂量组下降水平较其明显（P<0.05）。5.Western blot:与正常组相比,CIA大鼠模型组滑膜中TLR4、MyD88、IRAK-1、NF-κBp65的蛋白表达显着增加（P<0.05）。与模型组相比,MTX组和三百棒醇提物中,高剂量组TLR4、MyD88、IRAK-1、NF-κBp65的蛋白表达均降低（P<0.05）。其中,高剂量组的TLR4、IRAK-1、NF-κBp65的蛋白表达水平抑制效果较MTX明显（P<0.05）。6.RT-PCR:与正常组相比,CIA大鼠模型组滑膜中TLR4、MyD88、IRAK-1、NF-κBp65的mRNA表达显着增加（P<0.05）。与模型组相比,三百棒醇提物中,高剂量组TLR4、MyD88、IRAK-1、NF-κBp65的mRNA表达均呈降低趋势（P<0.05）。其中,高剂量组的TLR4、MyD88、NF-κBp65的mRNA表达抑制效果较MTX明显（P<0.05）。结论:（1）三百棒乙醇提取物对CIA大鼠关节炎有明显的改善作用,对关节滑膜病理变化有改善,其药效呈剂量依赖性。（2）三百棒醇提物可能通过抑制血清中炎症因子TNF-α和IL-1β的表达,降低TNF-α、IL-1β激活TLR4/NF-κB信号通路的炎症放大效应,降低炎症反应。（3）三百棒醇提物治疗RA作用机制可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路上相关基因表达。