【摘 要】
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本文旨在研究黄体期不同阶段注射前列腺激素(PGF2α)对育成绵羊生殖激素分泌、免疫细胞因子、前列腺素受体基因及程序性坏死通路基因表达的影响。选择健康、体况良好、体重相近、发情周期正常的湖羊育成母羊60只,用“孕酮栓+PMSG”法进行发情周期同步化处理后,选择发情基本同步的48只母羊随机均分为6组。发情当天记为第0d,黄体前期试验组、黄体中期试验组和黄体末期试验组绵羊分别在第6d、11d、16d注射
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本文旨在研究黄体期不同阶段注射前列腺激素(PGF2α)对育成绵羊生殖激素分泌、免疫细胞因子、前列腺素受体基因及程序性坏死通路基因表达的影响。选择健康、体况良好、体重相近、发情周期正常的湖羊育成母羊60只,用“孕酮栓+PMSG”法进行发情周期同步化处理后,选择发情基本同步的48只母羊随机均分为6组。发情当天记为第0d,黄体前期试验组、黄体中期试验组和黄体末期试验组绵羊分别在第6d、11d、16d注射1 mLPGF2α(0.1 mg),黄体前期对照组、中期对照组和末期对照组绵羊分别在第6 d、11 d、16 d注射1 mL生理盐水。每次注射后第0.5、1、2、3 h采血,用于血液指标检测,第3 h采集黄体组织,用于基因表达检测及HE组织染色检测黄体组织形态变化。结果表明:在黄体期不同阶段注射PGF2α对育成绵羊血清生殖激素及免疫指标的影响:①各试验组和对照组在注射PGF2α后的0.5、1、2、3 h间血清中FSH、LH、PRL、P4、E2水平以及TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-β水平无差异(P>0.05)。②试验组注射 PGF2α后 0.5、1、2、3 h血清中 FSH、LH、PRL及 IL-1β、IFN-β与对照组差异不显著(P>0.05);前期试验组注射PGF2α后第3 h的P4水平显著低于前期对照组,E2和IL-6水平显著高于前期对照组(P<0.05);前期试验组注射PGF2α后第2和3 h TNF-α水平显著高于前期对照组(P<0.05);中期试验组注射PGF2α后第1 h P4水平显著低于中期对照组(P<0.05)。③黄体前期注射PGF2α后,前期试验组0.5~3 h内FSH、E2、TNF-α、IL-6整体水平显著高于前期对照组(P<0.05),P4整体水平显著低于前期对照组(P<0.05),对LH、PRL、IL-1 β和IFN—β无影响(P>0.05);黄体中期注射PGF2α后,中期试验组0.5~3h内E2整体水平显著高于中期对照组(P<0.05),P4整体水平显著低于中期对照组(P<0.05),对 FSH、LH、PRL、TNF-α、IL-1β、IL-6 和 IFN-β无影响(P>0.05);黄体末期注射PGF2α对生殖激素与相关细胞因子没有显著性影响(P>0.05)。在黄体期不同阶段注射PGF2α对育成绵羊程序性坏死基因表达及卵巢形态的影响:①未注射PGF2α的对照组绵羊,黄体前期、中期FPA mRNA表达水平显著高于黄体末期(P<0.05);黄体前期FPB表达水平显著高于黄体末期(P<0.05),与黄体中期无差异(P>0.05);黄体中期TNFR1表达水平显著高于黄体前期和末期(P<0.05);黄体中期RIPK3表达水平显著高于黄体末期(P<0.05),黄体中、末期与黄体前期无差异(P>0.05);TNF-α、RIPK1和MLKL表达水平在整个黄体期没有显著变化(P>0.05)。②注射PGF2α后试验羊黄体组织形态发生了变化,出现炎症细胞浸润与细胞凋亡,其中黄体中期退化程度最高。③黄体前期注射PGF2α显著降低FPA表达水平(P<0.05),显著提高FPB、RIPK1、MLKL表达量(P<0.05),对TNF-α、TNFR1、RIPK3基因表达无影响(P>0.05);黄体中期注射PGF2α显著上调了FPB、TNF-α、RIPK1与MLKL表达量(P<0.05),对FPA、TNFR1和RIPK3表达没有影响(P>0.05);黄体末期注射PGF2α显著上调了RIPK1表达(P<0.05),对 FPA、FPB、TNF-α、TNFR1、RIPK3和MLKL 表达没有影响(P>0.05)。④FPA与RIPK3和TNFR1 mRNA表达呈正相关(P<0.05),FPB与MLKL和TNF-αmRNA表达呈正相关(P<0.05)。综上,PGF2α对黄体的作用存在阶段性差异,黄体前期对PGF2α的短期应答反应强于黄体中末期。PGF2α在黄体中期诱导黄体退化效果较好,PGF2α可能通过TNF-α/TNFR1通路启动程序性坏死,FPB在介导PGF2α诱导黄体退化和程序性坏死中发挥主要作用。
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