防治土传病害的几种主要化学农药对木霉菌厚垣孢子的影响

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木霉菌是一类重要的生防真菌,目前木霉菌商品化制剂以分生孢子制剂为主。与分生孢子相比,木霉菌厚垣孢子具有抗逆性强、存活期长等优点,因此木霉菌厚垣孢子制剂的商品化开发将成为木霉菌制剂的发展趋势。化学农药的使用和残留对木霉菌厚垣孢子制剂使用效果的影响还不清楚。本研究通过筛选了两株对多种土传病原真菌有较强拮抗效果的高效木霉菌菌株,制备了两株高效木霉菌的厚垣孢子,选择7种常用于土传病害防治的化学农药,包括五氯硝基苯、萎锈灵、甲霜灵、福美双、苯醚甲环唑、戊唑醇、多菌灵,测定了上述农药对厚垣孢子萌发和菌丝生长的抑制作用,从而明确不同化学农药对木霉菌厚垣孢子的影响。并进行了威百亩消毒土壤对木霉菌及黄瓜枯萎病菌的影响,以及五氯硝基苯与木霉菌厚垣孢子制剂对黄瓜枯萎病的协同防治实验。结果如下:1.木霉菌的筛选与鉴定采用平板对峙实验,筛选到两株对辣椒疫霉菌、黄瓜枯萎病菌、西瓜枯萎病菌、菠菜早疫病菌、棉花立枯病菌、小麦纹枯病菌有明显拮抗效果的木霉菌菌株758和610,通过形态学观察和分子鉴定,确定758号菌株为长枝木霉菌(T. longibrachiatum),610号菌株为哈茨木霉菌(T. harzianum)。2.木霉菌厚垣孢子的制备采用液体深层发酵工艺,制备了木霉菌758和610的厚垣孢子,发酵水平达到107-8个/mL发酵液。3.化学杀菌剂对木霉菌菌丝生长的影响比较七种化学杀菌剂抑制木霉菌菌丝生长的EC50,显示七种杀菌剂对两株木霉菌菌丝生长均具有不同程度的抑制作用。抑制木霉菌610菌丝生长的强弱顺序为:五氯硝基苯<甲霜灵<萎锈灵<福美双<戊唑醇<苯醚甲环唑<多菌灵,其中五氯硝基苯对610菌丝生长的抑制活性最低,EC50为1266.00μg/mL,多菌灵的抑制作用最强,EC50为0.05μg/mL。抑制758菌丝生长的强弱顺序为:甲霜灵<五氯硝基苯<萎锈灵<福美双<多菌灵<苯醚甲环唑<戊唑醇,其中五氯硝基苯和甲霜灵的抑制活性最低,EC50分别为1149.96μg/mL和1206.29μg/mL,戊唑醇抑制作用最强,EC50为0.32μg/mL。4.化学杀菌剂对木霉菌厚垣孢子萌发的影响比较七种化学杀菌剂抑制木霉菌厚垣孢子萌发的EC50,抑制610厚垣孢子萌发的强弱顺序为:五氯硝基苯<萎锈灵<甲霜灵<福美双<苯醚甲环唑<戊唑醇<多菌灵。其中五氯硝基苯抑制作用最弱,EC50为681.82μg/mL,抑制效果最强的为多菌灵,EC50为1.64μg/mL。抑制758厚垣孢子萌发的强弱顺序为:甲霜灵<五氯硝基苯<福美双<萎锈灵<戊唑醇<苯醚甲环唑<多菌灵,其中甲霜灵的抑制作用最弱,EC50为1108.61μg/mL,多菌灵的抑制作用最强,EC50仅为0.62μg/mL。5.威百亩消毒土壤对木霉菌和黄瓜枯萎病菌的影响威百亩消毒后的土壤对木霉菌758厚垣孢子和黄瓜枯萎病菌分生孢子的萌发以及菌丝生长均无明显抑制作用。但土壤中加入木霉菌758对黄瓜枯萎病菌具有抑制作用。6.同时施用木霉菌厚垣孢子制剂和五氯硝基苯防治黄瓜枯萎病实验单独使用木霉菌758厚垣孢子制剂对黄瓜枯萎病没有防治效果,施用758厚垣孢子制剂降低了五氯硝基苯对黄瓜枯萎病的防治效果,其原因有待于进一步研究。
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