利用抗草甘膦转基因棉花生产杂交种的制种方法

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棉花是我国重要的经济作物,棉花杂种优势明显,增产效果显著,但目前仍以人工进行杂交制种为主。草甘膦的喷施可导致棉花不育,这为利用抗草甘膦棉花进行杀雄制种提供了新思路,本试验以抗草甘膦的转基因棉花S06-1为材料,探讨在山东省进行生产杂交种的方法,主要研究结果如下:1.适宜草甘膦杀雄浓度的筛选以抗草甘膦棉花为母本,喷施不同浓度的草甘膦。结果表明,喷施3.6g/L浓度的草甘膦的转基因抗草甘膦棉花的花粉不育期长、成铃率高;喷施7.2g/L的草甘膦的转基因抗草甘膦棉花,虽然母本不育期长、但是成铃率低;喷施1.8g/L草甘膦的抗草甘膦棉花,虽然母本成铃率较高,但是有可育的花粉,影响杂种纯度。因此,推荐喷施3.6g/L浓度的草甘膦进行杂交制种。2.田间生产杂交种棉花种植密度的确定为确保杂交种产量,加大抗草甘膦棉花种植密度。结果表明,种植密度为52500株/公顷时,棉花的单株结铃数、亩铃数和产量最高,能达到2755.50kg/ha籽棉,杂交种的纯度可以达到92.5%。3.利用特定浓度的草甘膦区分杂交种与自交种利用1.44g/L的草甘膦分别涂抹杂交种和自交种棉花的叶片。7天后结果表明,抗草甘膦棉花杂交种基本无影响,非抗草甘膦棉花山农SF06叶片叶脉处出现黄色,但未有干枯脱落。21天后发现,抗草甘膦棉花顶端新生叶片可以正常生长,非抗草甘膦棉花的顶端叶片死亡,无法正常生长。涂抹1.44g/L的草甘膦,经叶片叶绿素含量测定表明,草甘膦降低了山农SF06叶片中叶绿素含量,而对抗草甘膦棉花S06-1叶绿素含量无影响。处理7天后,测定棉花叶片莽草酸的含量,结果表明,非抗草甘膦棉花叶片内部莽草酸含量积累,抗草甘膦棉花体内莽草酸含量与涂抹清水的叶片中莽草酸含量相近。1.44g/L的草甘膦处理下,非抗草甘膦棉花叶片中莽草酸含量的积累量约为抗抗草甘膦棉花中莽草酸含量积累量的三倍。可在室内用1.44g/L的草甘膦涂抹杂交种和自交种棉花的子叶,区分杂交种和自交种。4.以抗草甘膦转基因棉花S06-1为父本生产杂交种的探讨非抗草甘膦棉花山农SF06为母本,在棉花现蕾期,喷施100 mg/kg浓度的赤霉素,促进其开花后柱头延长,以抗草甘膦棉花S06-1为父本,进行人工授粉,对收获的杂交种在室内利用1.44g/L的草甘膦进行纯度鉴定,结果表明,利用这种方法获得的棉花杂交种的纯度为72.5%。
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