血管内皮抑素对人肺腺癌细胞A549及人脐静脉内皮细胞HUVEC的抑制作用及机制探讨

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目的:探讨血管内皮抑素对人肺腺癌细胞A549和人脐静脉内皮细胞HUVEC的作用及其可能的机制,为临床应用血管内皮抑素治疗肺癌提供理论依据。方法:1. MTT法检测不同浓度(10、20、30、40、50μg/ml,48h)血管内皮抑素对A549细胞、HUVEC细胞的影响;检测相同浓度(30μg/ml)血管内皮抑素作用不同时间(24、48、72h)对A549细胞、HUVEC细胞的影响。2.应用流式细胞术(FCM)检测血管内皮抑素(30μg/ml,48h)对A549细胞、HUVEC细胞的细胞周期及凋亡的影响。3. ELISA法检测不同浓度血管内皮抑素(20、30、40μg/ml,48h )对A549细胞、HUVEC细胞上清液中VEGF表达的影响。4. RT-PCR法检测血管内皮抑素(30μg/ml,48h)对A549细胞中Survivin基因表达的影响。结果:1. MTT检测,血管内皮抑素(20、30、40、50μg/ml)能有效抑制人肺腺癌细胞A549和人脐静脉内皮细胞HUVEC的增殖(P<0.05),该抑制效应具有时间-剂量依赖性。2.流式细胞术(FCM)检测,A549细胞与HUVEC细胞血管内皮抑素(30μg/ml,48h)作用后均出现细胞周期的阻滞与凋亡改变。3. ELISA法检测,血管内皮抑素(20、30、40μg/ml,48h)能抑制A549细胞及HUVEC细胞VEGF的表达,该抑制效应具有药物浓度依赖性。4. RT-PCR结果,与对照组(0μg/ml,48h)相比较血管内皮抑素(30μg/ml,48h)作用组能抑制A549细胞Survivin基因的表达,差异有显著性(P<0.05)。结论:1.血管内皮抑素能抑制人肺腺癌细胞A549和人脐静脉内皮细胞HUVEC的增殖,该抑制效应具有时间-剂量依赖性。2.血管内皮抑素抑制人肺腺癌细胞A549和人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖的机制为阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡。3.血管内皮抑素能抑制人肺腺癌细胞A549及人脐静脉内皮细胞HUVEC VEGF的表达,且该抑制效应有浓度依赖性。4.血管内皮抑素下调人肺腺癌A549细胞Survivin基因的表达可能是其诱导A549细胞凋亡的机制之一。
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