反义脱氧寡核苷酸对子宫内膜细胞FUT7/sLe~x表达及胚胎着床的影响

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胚胎的滋养层细胞与子宫内膜上皮细胞表面分子间的黏附是胚胎成功植入的关键。研究表明:在母-胎界面,植入窗口期的子宫内膜表面的岩藻化寡糖sLex(sialyl lewis x)呈阶段特异性表达,其作为选凝素的配体,可与胚胎表面的选凝素结合并在介导胚胎着床的初始分子黏附过程中发挥重要作用。岩藻糖基转移酶(fucosyltransferases,FUTs)是一类催化岩藻化寡糖合成的酶类,其中FUT7是合成sLex的关键酶。FUT7的表达调控对sLex合成及胚胎着床过程的影响尚不清楚。反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)是与靶基因mRNA具有互补序列,经化学合成的DNA分子。它干扰特定基因表达的调控作用是通过与靶mRNA碱基配对结合的方式,降解靶mRNA或抑制翻译过程而实现的。本研究应用人子宫内膜细胞(RL95-2)与人胚胎细胞(JAR)的体外着床模型,通过RT - PCR、Western blot及间接免疫荧光等检测方法,分析子宫内膜细胞转染FUT7的反义脱氧寡核苷酸后,子宫内膜细胞FUT7的表达及其对sLex合成水平的影响;通过胚胎黏附实验,检测FUT7反义脱氧寡核苷酸对胚胎着床的影响。实验结果表明:FUT7反义脱氧寡核苷酸可以抑制人子宫内膜细胞FUT7基因和蛋白的表达;降低细胞表面的sLeX寡糖抗原的合成,并使胚胎细胞与子宫内膜细胞的黏附率下降,在200nM的浓度下抑制效果最明显(P<0.05)。FUT7的反义脱氧寡核苷酸通过抑制子宫内膜细胞中FUT7的表达,使细胞表面的寡糖抗原sLex的合成降低,从而调节胚胎与子宫内膜的分子黏附。对岩藻糖基转移酶表达及调控的研究不仅有助于寡糖在着床过程中作用机制的探讨,并将为利用糖生物学手段进行着床过程的干预提供新的思路和手段。
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