【摘 要】
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[目的]:通过检测宫颈癌细胞Hela表面TRAIL死亡受体（DR4、DR5）及诱骗受体（DcR1、DcR2）的表达差异,观察Hela细胞系对TRAIL蛋白诱导凋亡敏感程度,分析细胞系表面DR4、DR5与DcR1、DcR
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[目的]:通过检测宫颈癌细胞Hela表面TRAIL死亡受体（DR4、DR5）及诱骗受体（DcR1、DcR2）的表达差异,观察Hela细胞系对TRAIL蛋白诱导凋亡敏感程度,分析细胞系表面DR4、DR5与DcR1、DcR2表达的相对程度与TRAIL诱导凋亡敏感性间的差异。探讨TRAIL参与宫颈癌细胞凋亡的程度,为临床治疗宫颈癌提供实验依据。 [方法]:宫颈癌细胞株Hela的培养采用RPMI-1640培养基+10%灭活小牛血清。 （1） Hela细胞以每孔2×104个细胞的浓度接种于96孔板,不同终浓度(10,20,100,200μg·L-1)的TRAIL蛋白加入至Hela细胞,继续培养24h后,各孔加入10μL MTT(终浓度为0.5g·L-1)孵育4h。弃掉培养基,各孔加入100μL二甲亚砜,充分混匀,酶标仪检测490nm波长下各孔吸光值（A）。 （2） 从Hela细胞中提取RNA,然后进行逆转录—聚合酶链（RT-PCR）反应。取扩增产物在2%琼脂糖凝胶上电泳,EB染色,紫外光下观察结果并照相保存,软件分析结果。 （3） 细胞沉淀溶于200μl PBS,不同管中分别加入小鼠抗人DR4,DR5,DcR1,DcR2的单克隆抗体各1μL,4℃孵育30min,冷PBS洗涤两次。细胞沉
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