启宫丸对痰湿证PCOS患者卵巢颗粒细胞PDCD4和PCNA表达的影响

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目的:观察启宫丸对痰湿证多囊卵巢综合征(polycystie ovarian syndrome,PCOS)卵巢颗粒细胞(granulosa cells,GCs)中程序性细胞死亡蛋白4(programmed cell death4,PDCD4)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响,从GCs增殖与凋亡角度探讨启宫丸改善痰湿证PCOS排卵功能,提高卵细胞质量的作用机理。方法:选取行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)的痰湿证PCOS患者66例,按照随机数字表法分为观察组(启宫丸+西药)和对照组(西药),每组33例,均行拮抗剂方案促排卵。观察组于IVF前一周期始在服用西药的基础上联合启宫丸进行治疗,对照组则不予中药干预。记录两组患者的一般资料,血清基础内分泌水平及血清抗苗勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH),计算身体质量指数(body mass index,BMI),并对治疗前后痰湿证候进行评分,比较两组患者促性腺激素(gonadotropins,Gn)天数和用量、HCG日血清黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)水平、获卵数、2PN受精率、优质胚胎率。同时,取卵日分离提取卵巢GCs后利用实时聚合酶链锁反应(quantitative-real time polymerase chain reaction,Q-PCR)及蛋白免疫印迹(western blot,WB)技术,检测两组GCs中PCNA和PDCD4的表达。结果:1.痰湿证候评分:观察组治疗后痰湿证候评分与治疗前相比明显降低,差异有统计学意义(p<0.01);对照组治疗前后痰湿证候评分相比,差异无统计学意义(p>0.05);治疗后痰湿证候评分,观察组和对照组比较,差异有统计学意义(p<0.01)。2.Gn天数和Gn用量:观察组和对照组比较,差异均不具有统计学意义(p>0.05)。3.观察组和对照组HCG日血清LH、E2、P水平比较:观察组HCG日血清E2水平高于对照组,差异有统计学意义(p<0.01);两组HCG日血清LH水平、P水平差异均无统计学意义(p>0.05)。4.获卵数:观察组与对照组比较,差异无统计学意义(p>0.05)。5.2PN受精率和优质胚胎率:观察组2PN受精率和优质胚胎率明显高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.01)。6.卵巢GCs中PDCD4和PCNA基因及蛋白相对表达水平的比较:观察组较对照组PDCD4表达下调,PCNA表达上调,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:启宫丸能提高行IVF-ET的痰湿证PCOS患者的2PN受精率和优质胚胎率,可能是通过下调患者卵巢GCs中PDCD4的表达和上调PCNA的表达来干预卵泡发育过程,调节激素水平,抑制痰湿证PCOS患者GCs细胞的凋亡,促进其生长,以改善卵子质量和胚胎发育潜能。
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