稀土氧化物对植物中化学成分的吸附特性研究

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黄酮类和蒽醌类物质具有多种生物药理活性,是新药开发的来源之一。但其在植物中含量低,难以富集,因此,开发一种快速、低成本、高选择性的方法,对分离纯化复杂体系中黄酮类和蒽醌类化合物具有重要意义。稀土氧化物(Rare earth oxides,ROEs)因其特殊的配位能力,在结构识别上有着极强的优势,已在蛋白质组学研究中实现了质谱检测前对磷酸化肽的高选择性分离。但将其作为吸附剂应用于植物中特定成分的选择性分离少有文献报道。本文基于稀土离子与黄酮类化合物之间的配位特性研究,采用ROEs作为吸附载体,对黄芩和虎杖提取液进行了吸附考察。结果表明,ROEs对黄芩和虎杖提取液中特定结构的黄酮类和蒽醌类化合物具有选择性吸附,与传统分离纯化方法相比,此方法最显著的优点是具有结构选择性,为植物中特定结构的成分的分离提供了思路。本文主要做了以下工作:1.以黄酮类化合物(槲皮素、黄芩素和山奈酚)为模型化合物,采用紫外-可见吸收光谱(Ultraviolet and Visible Spectrum,UV-Vis)、红外吸收光谱(Infrared Absorption Spectrum,IR)及核磁共振波谱(Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy,NMR)法,研究了黄酮类化合物与La3+、Ce4+、Eu3+在不同溶剂环境中的配位过程,即配位点、配合比和结合常数。结果表明:在室温下,通过简单混合,黄酮类化合物即可与稀土离子进行配位,配位点为黄酮类化合物中γ-吡喃酮羰基和邻位羟基。并且溶剂、配体和稀土离子的种类均会影响配体与稀土离子的结合能力。该实验初步证实了稀土离子可以与特定结构的黄酮类化合物进行配位,为后续固体ROEs配位吸附特定黄酮类化合物提供了理论基础。2.以ROEs(CeO2、La2O3和Eu2O3)为吸附载体,对黄酮类、生物碱类、皂苷类化合物进行了配位吸附特性探究,采用高效液相色谱法(High-Performance Liquid Chromatography,HPLC),研究了ROEs在不同溶剂环境中对化合物的选择性吸附情况。考察了溶剂、时间、温度、吸附剂种类对ROEs吸附槲皮素、黄芩素和山奈酚3种黄酮类化合物的影响,得出最佳吸附条件;并考察了溶剂、解吸附剂、解吸附时间对吸附后ROEs中物质的解吸附的影响,得出最佳解吸附条件。结果表明:三类结构的模型化合物共存时,ROEs对黄酮类化合物存在选择性吸附。该实验确证了ROEs对具有γ-吡喃酮上羰基和邻位羟基结构的黄酮类化合物有选择性吸附,吸附动力学符合拟二级动力学模型,吸附等温线遵循Langmuir吸附模型,表明ROEs表面均匀,对黄酮类化合物的吸附过程快速,且为单层吸附,吸附剂之间不发生化学相互作用。最佳吸附条件为:以CeO2为吸附剂,甲醇为溶剂,吸附时间为10 min,温度为45℃;最佳解吸附条件:解吸附剂为0.30%植酸丙酮,解吸附时间为15 min。3.以CeO2为吸附载体,通过HPLC法,采用建立的最优吸附和解吸附条件,对黄芩提取液(富含黄酮类化合物)和虎杖提取液(富含蒽醌类化合物)进行考察。采用高效液相色谱-串联质谱法(HighPerformance Liquid Chromatography-Triple Quadrupole Mass Spectrometry,HPLC-MS/MS)分析了黄芩、虎杖提取液HPLC图中色谱峰的结构。结果表明:CeO2可对黄芩、虎杖提取液中特定结构的黄酮类和蒽醌类化合物进行选择性吸附,并且在黄芩提取液中,选择性解吸附五种成分;在虎杖提取液中,选择性解吸附两种成分。此方法可为植物中特定结构的成分的分离纯化,提供新的思路。
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