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本文采用诱饵法监测棉花黄萎病圃土表和10cm土层微菌核萌发的同时分离微菌核际微生物。结果表明,在试验的120天内,地表和10cm土层处的微菌核萌发率均随时间的延长呈下降趋势,地表微菌核的萌发率从95.19%下降到65.74%,而10cm土层处的微菌核萌发率下降不稳定。从10cm土层的微菌核际分离的微生物种类比地表的微菌核际分离的要多。采用直接分离法分离自然病土中微菌核际微生物,共从土壤中的微菌核际分离微生物453株,其中细菌343株,占分离微生物总数的75.71%;微菌核际微生物的数量在7月上旬降到最少,然后有所回升,直到9月下旬达到最高峰,后又降低。 应用对峙培养测定法和双周微菌核测定法分别测定了部分微菌核际细菌对棉花黄萎病菌菌丝生长和对微菌核萌发和生长的影响。结果表明,42株微菌核际细菌对棉花黄萎病菌菌丝生长均有不同程度的抑制作用,抑菌率为4.55%~77.27%。其中23株拮抗细菌的抑菌率达到了50%以上,占测定微菌核际细菌总数的53.66%;从抑制内圈微菌核的萌发生长来看,有的拮抗细菌菌株可以完全抑制微菌核的萌发或杀死微菌核,有的可以推迟微菌核的萌发或抑制菌落的扩展,其抑制率为22.5%~100%,说明从微菌核际分离到的细菌,均具有杀死或不同程度抑制微菌核萌发和扩展的能力;从外圈微菌核萌发来看,外圈微菌核生长的菌落直径大于内圈微菌核的生长直径,说明拮抗细菌靠分泌抗生素来抑制微菌核的萌发和生长,而且拮抗细菌分泌的抗生素有扩散的能力。 对拮抗细菌的作用机理研究的结果表明,菌株NCD-2繁殖生长的最佳培养时间为108h,培养条件为弱碱性,液体培养时分泌胞外抑菌物质的最佳发酵培养时间为108h到120h。经有机溶剂萃取和紫外吸收测定发现,菌株NCD-2在发酵过程中不仅可产生大量的蛋白类物质,而且产生核酸类物质。应用蛋白质分离的常规方法,从拮抗细菌NCD-2无菌体发酵滤液中分离出蛋白类物质,发现这些物质对棉花黄萎病菌具有抑菌作用,同时对热表现稳定,为耐热蛋白,采用对峙法测定了10株拮抗细菌产生β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的能力,结果发现,供试的10株拮抗细菌中只有CS-25和NCD-25能够产生β-1,3-葡聚糖酶,培养7天后透明圈直径分别可达37.25mm和30.00mm;供试的10株拮抗细菌均不能产生几丁质酶。 分别在温室营养钵、室内平板条件下研究了拮抗细菌在棉苗根部和体内的定殖 I可北大业人学矾十学w2工与传导,结果表明,菌株C-28不仅能在种子表面和胚根各段定殖,而且能随根的生长而扩展;整条胚根上C-28的数量变化是从根基向根尖逐渐减少。通过在棉茎中注射利福平标记的C-28菌液,证明该菌能够沿棉茎向上、下两个方向传导,在接种后第28天时,根、茎、叶中C-28的分离频率分别为45o、72.5o和90%。 利用桔抗效果明显的菌株进行防治棉花黄萎病的室内和田间试验。室内试验结果表明,桔抗细菌ICB-18,NCD-2,CS-25和CS-27对棉花黄萎病的防治效果分别为 sl.4%,77.0%,75.7%和 72.3%,表现了较高的防治效果;桔抗真菌 VLJ和 VL-2能极显著降低棉花黄萎病的病情指数,相对防效分别为87.9%和66.4%,也能有效地控制棉花黄萎病的发生为害。田间试验结果表明,菌株 NCD-2的防效可达 92石%,菌株 VL-l和 VL-2的防效分别为 76石%,77.l%,高于德国生防菌剂 TF的防效。 利用人工繁值的微菌核对分离微菌核际微生物的条件进行探讨。结果表明,用0.l%次氯酸钠处理微菌核两次,每次10s,消毒效果好,且不影响微菌核的萌发;分离微菌核际微生物的有效转速为 6 000fpm。 用对峙培养法,测定了菌株NCWZ和C-28对19种病原真菌的抑菌作用,结果表明,菌株NCD-2和C-28除对立枯丝核菌抑菌作用较弱外对其他棉花病原菌(大丽轮枝菌、棉刺盘泡菌、尖泡镰刀菌萎蔫专化型)均具较强的抑菌能力,对其他13种病原真菌都有不同程度的抑菌作用。