LcAPX基因对植物镉耐受的影响及水稻组织培养条件的优化

来源 :天津大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ananluo2009
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本研究通过PCR分析和RT-PCR分析筛选出转LcAPX基因阳性烟草。并以转基因烟草作为实验组,非转基因烟草作为对照组,进行镉金属胁迫处理,来探究过表达LcAPX基因对烟草镉耐受能力的影响。通过测定两组烟草的表型、相关酶活性以及类胡萝卜素含量等生理生化指标,经统计学分析,本研究得出如下结论:1.转基因烟草具有更强的抗氧化能力。镉胁迫会导致烟草内积累大量过氧化氢,转基因烟草APX活性更强,对过氧化氢的清除能力也明显高于对照组。相比于对照组,转基因烟草在镉处理下叶片内积累的MDA较少。转基因烟草内相关抗氧化酶系对镉胁迫更加敏感。受到镉胁迫时,转基因烟草及非转基因烟草内SOD、POD含量都明显上升。与对照组相比,在镉胁迫下,转基因烟草SOD、POD活性更高。2.镉处理下,与对照组相比,转基因烟草对镉胁迫耐受性显著增加。转基因烟草由镉胁迫导致的表型变化小于对照组。在镉处理下,转基因烟草叶片气孔开度显著大于对照组。对根长及种子萌发率等指标进行检测发现转基因烟草受到的镉离子的影响更小。综上,过量表达LcAPX基因显著提高了转基因烟草对镉的耐受性。在对烟草类胡萝卜素含量进行分析时发现,转基因烟草总类胡萝卜素含量显著高于非转基因烟草。转基因烟草中叶黄素及玉米黄质含量显著高于非转基因烟草。此外,本研究建立并优化了水稻组织培养的技术体系,其中包括水稻种子灭菌及转化操作后脱菌的实验条件,不同浓度2,4-D对于水稻种子诱导愈伤的影响,不同培养时间的愈伤组织的分化率。
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