山兰的化学成分及其生物活性研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pearljeejee
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目的:通过对中药山兰中未知化学成分的提取、分离与结构鉴定,以及对化合物的体外抗氧化、抗菌活性研究,为山兰药用资源的深入开发利用提供理论基础。方法:采用冷浸法提取,用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,采用凝胶柱层析、硅胶柱层析和(RP-18)反相柱层析等分离方法,结合薄层色谱法对化合物进行分析与追踪,再利用重结晶等技术手段,对山兰中化学成分进行分离纯化;应用核磁共振(1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HMQC)及质谱(MS)等多种波谱技术,结合相关文献,对所得单体化合物结构进行解析;采用DPPH自由基清除法,对山兰药材中分离得到的单体化合物进行抗氧化活性测试;应用MTT法对山兰药材中分离得到的单体化合物进行抑菌活性测试。结果:本文从中药山兰中共分离得到16个单体化合物,鉴定出其中11个单体化合物的结构,主要有甾体类、四环三萜类、羧酸类、醛类、黄酮类、苷类等化合物。其中,甾体类化合物2个:β-谷甾醇(1)、β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside(2);四环三萜类化合物1个:(24S)-24-methyl-25,32-cyclo-5α-lanosta-9(11)-en-3β-ol(3);羧酸及其衍生物类化合物3个:hexadecanoic acid(4)、hexadecanoic acid,2,3-dihydroxypropyl ester(5)和9-octadecenoic acid-2’,3’-dihydroxy propyl ester(6);醛类化合物2个:vanillin(7)和3-hydroxy-4-methoxybenzaldehyde(8);黄酮及黄酮苷类化合物3个:quercetin(9)、isoquercitrin(10)和芦丁(11)。通过分析6个化合物对DPPH自由基的清除能力,其抗氧化活性顺序为:vanillin>β-谷甾醇>hexadecanoic acid>未知(SL-a)>3-hydroxy-4-methoxybenzaldehyde>(24S)-24-methyl-25,32-cyclo-5α-lanosta-9(11)-en-3β-ol。其中,vanillin、β-谷甾醇和hexadecanoic acid这3种化合物的IC50值分别为0.66 mg/mL、0.67 mg/mL和0.71 mg/mL,抗氧化能力较其他化合物强。通过MTT法对6个单体化合物的抑菌活性进行分析,结果表明,化合物hexadecanoic acid具有非常明显的抑制细菌生长作用,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌的生长抑制率均较高。β-谷甾醇和vanillin,也具有较好的抑菌作用。结论:在所鉴定出的化合物中,3-11号化合物均为首次从山兰药材中分离得到,为揭示中药山兰传统功效的药效物质奠定了基础,也为山兰资源的深入开发利用提供了理论依据;生物活性的研究成果为山兰药材的深入开发利用提供了科学依据,对促进山兰药材的产业发展具有重要意义。
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