【摘 要】
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目的：观察人肿瘤坏死因子-α (TNF-α)对人脐静脉血管内皮细胞(EA.hy926)结构和功能的影响，并初步探讨其作用机制。方法：培养人脐静脉血管内皮细胞EA.hy926，分组加入1、10、100ng
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目的：观察人肿瘤坏死因子-α (TNF-α)对人脐静脉血管内皮细胞(EA.hy926)结构和功能的影响，并初步探讨其作用机制。方法：培养人脐静脉血管内皮细胞EA.hy926，分组加入1、10、100ng/ml TNF-α培养24h，或加入100ng/ml TNF-α培养3、8、12、24h，采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测细胞中血管扩张刺激磷蛋白（VASP）的表达水平；采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测细胞中VASP mRNA的表达水平，采用流式细胞仪检测细胞凋亡，采用透射电子显微镜观察细胞超微结构的变化。结果：与空白对照组比较，TNF-α引起血管内皮细胞VASP蛋白和mRNA的表达水平下降，呈时间和剂量依赖性；随着TNF-α作用时间的延长或作用浓度的增加，细胞受损程度增加，并且可以观察到细胞凋亡比率增加。结论：TNF-α通过破坏血管内皮细胞结构和功能导致血管内皮细胞通透性增高，呈时间与剂量依赖性。
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