不同初加工方式对山银花质量影响及活性评价

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山银花(Lonicerae Flos)作为传统中药材,也是具有药食同源属性的大宗中药材品种,具清热解毒、疏散风热之功效。山银花是湖南的道地药材,其基源植物为灰毡毛忍冬。由于干燥方式的多样化,不同初加工方式影响山银花药材质量,本文基于HPLC-Q-TOF-MS和HS-SPME-GC-MS分析不同杀青方式(滚筒杀青、蒸汽杀青、不杀青)和干燥温度对两种山银花(“五彩花”、“湘蕾”)中挥发性成分、有机酸类及皂苷类成分等化学成分的影响,并对山银花中各萃取部位进行活性评价。旨在为山银花的产地初加工技术和质量控制提供理论依据,并为山银花的进一步开发提供帮助。鉴于此,本文主要取得如下结论:1.通过LC-MS和GC-MS法对两种山银花(“五彩花”、“湘蕾”)中的化学成分进行分析。结果表明,从“五彩花”共鉴定出27种化学成分及42种挥发性成分,主要有16种有机酸、8种皂苷;从“湘蕾”共鉴定出31种化学成分及41种挥发性成分,主要有有机酸16种、皂苷10种,两种山银花化学成分较为相似,但槲皮素-3-O-葡萄糖苷、苜蓿素-7-O-葡萄糖苷、3-O-α-L-rhamno-pyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosy hederagenin异构体、Dipsacussaponin A四种化学成分仅在“湘蕾”中检出。山银花中主要有醇类、酯类、酸类、酮类、烯烃类、吡嗪类和醛类等挥发性成分,其种类差异较大,共有组分为24种,“五彩花”中大部分化合物的响应值低于“湘蕾”。2.通过HS-SPME-GC-MS法对不同初加工方式(蒸汽杀青45℃干燥、滚筒杀青45℃干燥、不杀青45℃干燥、直接冷冻干燥)处理的两种山银花中挥发性成分进行分析。结果表明山银花挥发性成分含量和种类都受干燥方法的影响;主成分分析结果表明45℃直接干燥对“五彩花”中挥发性成分的影响不显著;直接冷冻干燥对“湘蕾”中挥发性成分的影响较小。3.通过建立山银花4种有机酸类化合物(绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C)和2种皂苷类化合物(灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙)的HPLC-DAD/ELSD检测方法,并对不同初加工方式(蒸汽杀青、滚筒杀青、不杀青+45~125℃干燥;?=10℃)下两种山银花中6种化学成分含量进行分析,同时,基于主成分分析对其进行评价。结果表明,杀青后两山银花中有机酸和皂苷类成分的含量较高;干燥温度可显著影响山银花中有机酸类化合物,但皂苷类化合物受温度影响较小。主成分分析结果表明,蒸汽杀青65℃烘干处理的“五彩花”综合评价最佳;“湘蕾”则是用蒸汽杀青75℃烘干处理综合评价最佳。4.采用脂多糖(LPS)诱导的细胞炎症模型和H2O2诱导的细胞氧化应激模型,对“湘蕾”不同萃取部位进行抗炎、抗氧化活性评价,并通过HPLC-Q-TOF-MS分析具有显著活性的萃取部位的化学成分。结果表明,山银花甲醇提取物及其各萃取部位(50μg/m L)均有不同程度的抗炎、抗氧化活性。其中水饱和正丁醇萃取部位的抗炎活性最强,初步鉴定该部位中的17个有机酸类和皂苷类成分;乙酸乙酯萃取部位的抗氧化能力最强,初步鉴定该部位中的12个有机酸类成分。
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