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癌症,是目前威胁人类健康最主要的疾病之一。其中,结肠癌具有死亡率高、预后性差等特征,并且中国是一个结肠癌的高发地带。现阶段,结肠癌的治疗主要是包括手术切除、放射疗法以及药物治疗等等手段,然而,在药物疗法中,在临床上能够被用于治疗结肠癌的药物仍相对稀缺,因此,研发出新型抗结肠癌药物的需求非常紧迫,且意义十分重大。近年来,基于喹啉及其衍生物的抗癌药物被广泛应用于肺癌、肝癌以及结肠癌等的治疗中。喹啉之所以被越来越多的研究者所青睐,主要因为它是一类具有多重优良生物活性的药物中间体。然而,喹啉类药物的抗癌活性仍需要进一步提高,其毒副作用也需要进一步降低。因此,我们在喹啉的基础之上,对其化学结构进行了修饰,希望能够开发出新型喹啉类衍生物,不仅仅是有效地提高喹啉类药物的抗肿瘤活性,而且还能够降低药物对患者的毒副作用。经过体外细胞活力的测定,喹啉衍生物RQ-43是对结肠癌细胞活力抑制最为明显的化合物。因而我们将RQ-43作为抗结肠癌肿瘤药物的候选化合物,并对其抑制结肠癌肿瘤生长的分子机制进行了初步研究。本研究针对RQ-43分别在体内、体外的抗结肠癌细胞活性效果及其机制进行了初步研究。本研究结果显示:RQ-43是通过诱导细胞凋亡与细胞自噬来对肿瘤细胞起到杀伤作用。一方面,通过Western blot对凋亡标志蛋白的检测以及Annexin-VFITC/PI双染法的检测,结果表明,RQ-43能够诱导结肠癌细胞凋亡。然而在Caspase广谱抑制剂Z-VAD-fmk对结肠癌细胞系HCT116进行预处理后,发现其无法阻断RQ-43对细胞的杀伤作用,因而推测RQ-43可能不依赖于Caspase途径来杀伤结肠癌细胞。当用JNK抑制剂SP600125对结肠癌细胞系HCT116进行预处理后,通过细胞活力检测以及Annexin-V FITC/PI双染法检测,发现SP600125能够提高结肠癌细胞HCT116对RQ-43的药物敏感性,因此推断RQ-43所诱导的细胞凋亡可能依赖于JNK信号通路的激活。另一方面,使用RQ-43刺激结肠癌细胞时,发现其能够诱导细胞自噬。同时,mCherry-EGFP-LC3B荧光点聚集和氯喹均证明了 RQ-43能够使HCT116细胞发生自噬潮,当我们用SP600125对HCT116细胞进行预处理后,发现LC3B-Ⅱ的蛋白水平与未预处理组相比并未发生明显变化,由此我们认为RQ-43诱导HCT116细胞发生自噬可能不依赖于JNK的激活。当我们用RQ-43处理HCT116 ATG5-/-细胞时,发现其对药物的敏感性比野生型细胞要高,由此我们认为ATG5是RQ-43诱导细胞发生自噬的关键因子。以上所有的实验结果初步表明RQ-43在体外能够诱导结肠癌细胞发生凋亡和自噬。RQ-43除了在体外研究之外,我们还建立了小鼠结肠癌细胞系CT26-CL25 BALB/c小鼠的同源移植瘤模型,以验证RQ-43在体内对结肠癌细胞的抑制作用。通过比较肿瘤生长曲线、动物存活率、肿瘤重量,我们发现RQ-43在体内也有明显的抑肿瘤生长效果。因此,本研究表明RQ-43可作为细胞凋亡与细胞自噬的诱导剂,并在结肠癌的化学治疗中具有潜在的应用前景。