目的:探讨宫颈癌中Rap1GAP表达下调机制，为进一步揭示宫颈癌发生发展的分子生物学机制奠定理论基础。　　 宫颈癌位于世界女性恶性肿瘤死亡顺位的第二位。据WHO报道，每年近有51万宫颈癌新发病例和28.8万死亡病例，其中发展中国家约占80％:非洲6.8万、拉丁美洲7.7万、亚洲24.5万。肿瘤的发生发展与多种因素有关，原癌基因的激活和抑癌基因的失活是其重要的分子生物学机制。流行病学研究证实宫颈癌的发生与高危型人乳头瘤病毒的感染密切相关，其致癌机制主要通过高危型人乳头瘤病毒癌蛋白E6对癌基因或抑癌基因的激活、失活起作用，如E6通过泛素-蛋白酶体途径降解Rap1GAP同家族成员E6TP1(E6targetprotein1)，这一机制与宫颈癌的发生发展密切相关。抑癌基因Rap1GAP(Rap1GTPase-activatingprotein1)在多种肿瘤中表达下调，体外过表达Rap1GAP后肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移等生物学功能受到抑制，进而发挥其肿瘤抑制功能。　　 本研究组前期实验显示，宫颈癌组织内Rap1GAP表达下调，并且Rap1GAP蛋白表达水平与HPV感染呈负相关。因此本文将探讨高危型人乳头瘤病毒癌蛋白E6对Rap1GAP蛋白降解的影响，以期阐明宫颈癌中Rap1GAP表达下调的分子生物学机制。　　 方法:1.采用脂质体转染法将HPV16E6质粒转染入细胞中，荧光显微镜下及RT-PCR法检测外源基因转染效率2.采用Westernblot方法观察HPV16E6对细胞中内源性Rap1GAP蛋白降解的影响3.采用MTT法观察不同浓度MG132对细胞增殖的抑制情况4.采用脂质体法将Rap1GAP及HPV16E6质粒共转染入细胞中，Westernblot方法观察MG132对HPV16E6降解Rap1GAP的影响。　　 结果:　　 1.荧光显微镜观察显示，vector共转染组与E6共转染组转染效率约60％-70％。　　 2.(1)在Hela细胞中，过表达HPV16E6后，Rap1GAP蛋白的相对表达量（0.777±0.150）明显低于未转染组（1.150±0.092），差异具有显著性(p＜0.05)。(2)而在HEK293细胞中，过表达HPV16E6后，Rap1GAP蛋白的相对表达量（0.890±0.128）与未转染组（1.140±0.203）相比差异无显著性(p＞0.05)。　　 3.不同浓度MG132对细胞增殖影响的实验表明，与空白组和DMSO组相比，当MG132为1μM时，其对细胞增殖无明显抑制作用(p＞0.05);MG132为3μM时，第三天起对细胞增殖产生抑制作用(p＜0.05);MG132＞5μM时，第二天起即对细胞增殖产生抑制作用(p＜0.05)。　　 4.将Rap1GAP及HPV16E6质粒共转染入细胞后，在Hela细胞中，外源性Rap1GAP蛋白的相对表达量（0.860±0.028）低于对照组（1.050±0.014），差异具有显著性(p＜0.05);加入MG132（1μM、3μM）后，外源性Rap1GAP蛋白的相对表达量分别为（1.085±0.064）和（1.045±0.050），与对照组(1.055±0.106)和（1.015±0.120）相比，差异均无显著性(p＞0.05);而在HEK293细胞中，无MG132时，E6共转染组外源性Rap1GAP蛋白的相对表达量（1.130±0.212）与对照组(1.085±0.148)相比差异无显著性(p＞0.05);加入MG132（1μM，3μM）后，E6共转染组外源性Rap1GAP蛋白的相对表达量分别为（1.155±0.050）和（1.125±0.107），与对照组(1.145±0.177)和(1.185±0.106)相比，差异均无显著性(p＞0.05)。　　 结论:　　 1.Hela细胞中Rap1GAP蛋白可被HPV16E6降解;而HEK193细胞中Rap1GAP蛋白不被HPV16E6降解。　　 2.HPV16E6降解Rap1GAP蛋白通过泛素-蛋白酶体途径。