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背景:针灸治疗类风湿关节炎临床疗效好,但是其作用机制尚不清楚,本次实验用佐剂型关节炎大鼠探讨电针抗炎的分子机制,为临床疗效提供客观的实验依据。目的:观察电针“足三里”、“悬钟”穴对佐剂性关节炎大鼠MMP-3、MMP-9表达的影响,探讨电针抑制AA大鼠的炎性反应和滑膜增生的分子机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、穴位组和非穴位组,每组10只。采用在足垫部注射弗氏完全佐剂法制备关节炎大鼠模型,对照组用生理盐水模拟造模。穴位组大鼠予电针双侧“足三里”、“悬钟”穴,2Hz,15 min/次,每2天1次,共计8次。非穴位组在“足三里”、“悬钟”穴向外旁开5mm处予以针刺透皮,电刺激强度与穴位组相同。对照组和模型组不做干预。在造模后第3天、8天、13天、18天分别采用关节炎指数评分系统评价模型大鼠的关节炎指数;第18天处死大鼠,采集腹主动脉血和踝关节滑膜组织,用HE染色法观察大鼠踝关节的病理形态学改变;Tunnel法检测模型大鼠踝关节滑膜细胞凋亡情况;RT-PCR检测踝关节滑膜的MMP-3、MMP-9的m RNA表达,western blot检测踝关节滑膜的MMP-3、MMP-9的蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清MMP-3和MMP-9表达。结果:1.关节炎指数结果显示,各个时间点上,模型组大鼠的关节指数评分显著高于对照组(P<0.05);第18d,穴位组大鼠的关节炎指数评分显著低于模型组和非穴位组的指数评分(P<0.05)。2.病理切片显示,模型组和非穴位组大鼠踝关节滑膜细胞呈过度增殖状态,炎性细胞显著增多。穴位组大鼠踝关节滑膜组织中滑膜细胞增生程度显著低于模型组和非穴位组,且炎性细胞数较少。3.Tunnel法检测结果显示,模型组、穴位组和非穴位组大鼠滑膜细胞凋亡率显著高于对照组的滑膜细胞凋亡率(P<0.05);穴位组大鼠滑膜细胞凋亡率显著高于模型组滑膜细胞凋亡率(P<0.05);非穴位组大鼠滑膜细胞凋亡率与模型组比较结果差异无统计学意义(P<0.05)。4.RT-PCR检测结果显示,MMP-3、MMP-9m RNA在模型组表达水平显著高于对照组的表达水平(P<0.05);MMP-3、MMP-9m RNA在穴位组中的表达水平显著低于模型组和非穴位组的表达水平(P<0.05);MMP-3、MMP-9m RNA在非穴位组中的表达水平与模型组比较结果差异无统计学意义(P<0.05)。5.western blot检测结果显示,MMP-3、MMP-9蛋白在模型组表达水平显著高于对照组的表达水平(P<0.05);MMP-3、MMP-9蛋白在穴位组中的表达水平显著低于模型组和非穴位组的表达水平(P<0.05);MMP-3、MMP-9蛋白在非穴位组中的表达水平与模型组比较结果差异无统计学意义(P<0.05)。6.酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测结果显示,模型组大鼠MMP-3、MMP-9血清的含量显著高于对照组(P<0.05);穴位组和非穴位组MMP-3、MMP-9的血清含量显著低于模型组(P<0.05);非穴位组MMP-3、MMP-9血清含量显著高于穴位组(P<0.01)。结论:1.电针“足三里”、“悬钟”穴可以减轻佐剂型关节炎大鼠的关节炎症,提高滑膜细胞凋亡率,促进组织修复,从而控制病情进展。2.电针“足三里”、“悬钟”穴可以调控血清和局部组织中MMP-3、MMP-9的表达水平,促进滑膜细胞的凋亡,进而控制佐剂型关节炎大鼠的关节炎症。