肠淋巴液引流改善休克大鼠乳头肌收缩功能的实验研究

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背景:失血性休克后心肌收缩功能障碍导致的心泵功能降低是加重微循环障碍、引起其它器官损伤、导致休克难治甚至死亡的关键因素。引起心肌收缩功能障碍的因素很多,其中,乳头肌收缩功能障碍是导致心脏泵功能的重要发病学基础,且乳头肌钙敏感性障碍是失血性休克后心肌收缩功能障碍的发病机制之一。研究表明,失血性休克后肠淋巴液(post-hemorrhagic shock mesenteric lymph,PHSML)回流是加重心肌损伤、引起心脏泵功能障碍的重要因素,但PHSML回流是否与乳头肌的收缩功能障碍有关,其机制是否与钙敏感性有关?值得研究。目的:本研究采用大鼠失血性休克模型,以PHSML引流为手段,以离体乳头肌为研究对象,探讨PHSML引流对休克大鼠乳头肌收缩力以及心肌钙敏感性的作用,揭示PHSML在心肌收缩功能障碍中的作用,为临床上以休克肠淋巴液为靶点防治心肌收缩功能障碍提供实验依据。方法:健康清洁级Wistar雄性大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、休克组(Shock组)、休克肠淋巴液引流组(Shock+drainage组)。所有大鼠用1%戊巴比妥钠(50 mg/kg)行全身麻醉,分别分离左、右侧股血管,于右侧股静脉注射0.5%肝素(1 ml/kg,500 U/kg)全身抗凝;右侧股动脉插管连接Power Lab生物信号采集系统,实时监测平均动脉血压(mean artery pressure,MAP);于左股侧动脉插管并将其固定于抽注机上放血备用。待手术完成后稳定30 min,休克组与引流组大鼠经左侧股动脉匀速缓慢放血,10 min内将MAP降至40 mm Hg,复制失血性休克模型,并通过推注机调整放血量使MAP维持在(40±2)mm Hg水平;Shock+drainage组大鼠按上述方法复制失血性休克模型后行肠系膜淋巴管插管,于低血压1 h行肠淋巴液引流,至休克3 h;假手术组大鼠行相同的手术操作,不放血。在休克3 h及相应时间点,在体视显微镜下,留取右室乳头肌,一根乳头肌用来观察对梯度异丙肾上腺素(isoprenaline,Iso)(终浓度为1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L)的收缩反应性;另一根乳头肌用于观察对梯度Ca2+(终浓度依次为2.5×10-4、5×10-4、1.5×10-3、2.5×10-3 mol/L)的收缩性,反映乳头肌收缩的钙敏感性。结果:Shock组shock+drainage组与大鼠乳头肌对梯度Iso的收缩力反应性、+df/dt均显著低于sham组(P<0.05),且shock+drainage组大鼠乳头肌对1×10-7、1×10-6 mol/L浓度Iso的收缩力反应性显著高于shock组(P<0.05);Shock组大鼠乳头肌对Iso(1×10-7、1×10-6 mol/L)收缩的-df/dt均显著低于sham组(P<0.05);shock+drainage组大鼠乳头肌在1×10-7 mol/L时显著高于shock组(P<0.05)。Shock组大鼠乳头肌对梯度钙离子(2.5×10-4、5×10-4、1.5×10-3、2.5×10-3 mol/L)的收缩力反应性均显著低于sham组(P<0.05),shock+drainage组大鼠乳头肌在5×10-4、1.5×10-3、2.5×10-3 mol/L时的收缩力显著高于shock组(P<0.05);Shock组大鼠乳头肌对梯度钙离子多个浓度点的±df/dt均显著低于sham组(P<0.05),shock+drainage组大鼠乳头肌对梯度钙离子多个浓度点的±df/dt均显著高于shock组(P<0.05)。结论:肠淋巴流引流提高了失血性休克大鼠离体心室乳头肌对梯度异丙肾上腺素的反应性,其机制与肠淋巴液引流上调乳头肌的钙敏感性有关;研究结果为以休克肠淋巴液为靶点,对于休克后心肌收缩功能的恢复提出了新思路。
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