人食管鳞癌细胞株TE13 RIZ1基因蛋白表达状态的研究

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目的:探讨特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-杂氮-2’脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人食管鳞癌细胞株TE13中视网膜母细胞瘤结合锌指结构基因1(Retinoblastoma protein interacting zinc finger gene1, RIZ1基因)蛋白表达和细胞增殖状态的影响。方法:1.应用5-Aza-CdR处理人食管鳞癌细胞株TE13,采用蛋白免疫印迹技术(Western blotting)检测细胞中RIZ1基因蛋白的相对表达量,比较药物处理前后以及不同的药物作用时间人食管鳞癌细胞株TE13中RIZ1基因蛋白相对表达量的变化。2.应用5-Aza-CdR处理人食管鳞癌细胞株TE13,采用流式细胞技术检测细胞的增殖状态,比较药物处理前后以及不同的药物作用时间人食管鳞癌细胞株TE13凋亡率的变化。结果:1.与相应对照组相比,经过5-Aza-CdR处理48h和72h后的人食管鳞癌细胞株TE13RIZ1基因蛋白表达明显提高,差异有统计学意义(p<0.01);3个实验组间比较,随着药物处理时间的延长,RIZ1基因蛋白的表达量逐渐升高,差异有统计学意义(p<0.01);2.与相应对照组相比,经过5-Aza-CdR处理24h、48h、72h后的人食管鳞癌细胞株TE13的细胞凋亡率明显升高,差异有统计学意义(p<0.01);3个实验组间比较,随着作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐升高,差异有统计学意义(p<0.01)。结论:1、特异性的甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR能够提高人食管鳞癌细胞株TE13中RIZ1基因的蛋白表达,进一步说明RIZ1基因表达沉默或降低的原因之一是DNA的甲基化。2、特异性的甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR能够促进人食管鳞癌细胞株TE13的凋亡。并且随着作用时间的延长,其作用愈加明显。提示RIZl基因(启动子区)甲基化是部分人食管鳞癌发生和发展的机制之一。
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