论文部分内容阅读
目的 胃癌是常见的消化道肿瘤,严重危害人类健康。在其发生、发展过程中,涉及到一系列的遗传学改变,包括癌基因的激活及抑癌基因的失活等,多种基因异常改变导致胃癌发生。本研究应用mRNA差异显示技术比较胃癌、癌前病变和正常胃粘膜之间基因表达的差异,寻找与病变发生、发展相关的基因,以探讨胃癌发生发展的分子机制。 方法 收集胃镜活检标本与手术标本,其中胃低分化腺癌4例,胃癌前病变2例,正常对照4例。分别提取组织中的总RNA,选取3种锚定引物和1种随机引物进行差异显示逆转录PCR,扩增产物经电泳分析,鉴别并分离差异表达的基因片段,进行再扩增。利用T-载体将扩增后的基因片段克隆,然后测序,测序结果提交GenBank经BLAST软件检索,寻找与之高同源性基因的有无。 结果 经差异显示分析,共找到差异表达的序列片段6个,经克隆后测序均一次测通。在癌组织高表达的4个序列片段中,一个与编码已知功能的蛋白(SPECTRIN ALPHA-Ⅱ)的基因(SPTAN1)同源性达99%,两个序列片段虽已有报道但功能未知,还有一个未检索到与之高度同源的序列,有可能是新的序列片段。在正常组织、癌前病变组织高表达的2个序列片段中,一个已发现高同源性的序列,但功能未知,另一个未检索到与之高度同源的序列,可能是未报道过的新序列片段。 天津医科大学硕士学位论文 结论 本研究发现了六个在胃癌、癌前病变及正常胃粘膜中差异表达的序列片段, 推测其可能与胃癌的发生、发展过程有关。其中四个已经获得序列并检索到 与己知序列有高度同源性,另两个差异片段未发现与之高度同源性的序列, 可能是未报道过的新序列片段。在胃癌组织中可能存在SPTANI的高表达。