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第一部分:苯那普利和缬沙坦联合应用对肾小球硬化及系膜基质的影响
目的:探讨血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-convertingenzymeinhibitor,ACEI)-苯那普利和血管紧张素Ⅱ1-型受体拮抗剂(angiotensinⅡtype-1receptorantagonist，AT1RA)-缬沙坦联合应用对肾小球硬化的影响及其作用机制。
方法:60只SD大鼠随机均分为五组，即正常对照组(对照组)、模型组、苯那普利治疗组(苯那普利组)、缬沙坦治疗组(缬沙坦组)及苯那普利和缬沙坦联合治疗组(联合组)，每组12只。对模型组和三治疗组大鼠行单侧肾脏切除，1周后给予阿霉素(5mg/kg)尾静脉注射，建立肾小球硬化模型。自注射阿霉素后，苯那普利和缬沙坦两组分别给予苯那普利6mg/kg.d、缬沙坦20mg/kg.d灌胃，联合组给予苯那普利3mg/kg.d、缬沙坦10mg/kg.d联合灌胃，12周后全部处死。观察各组大鼠的尿蛋白、血白蛋白、胆固醇等生化值及肾脏病理改变，免疫组化法检测肾脏组织中Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白的表达。
结果:(1)联合组尿蛋白自第5周起较模型组明显降低(P＜0.05)，苯那普利和缬沙坦两组自第7周起才较模型组明显降低(P＜0.01)，12周时缬沙坦组、联合组尿蛋白小于苯那普利组。(2)实验结束时，三治疗组血白蛋白均较模型组明显增高(P＜0.05)。(3)肾小球硬化指数(GSI)三治疗组较模型组明显降低(P均＜0.01)，但三治疗组之间无显著差异。(4)免疫组化结果显示，Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白在对照组表达最少(P均＜0.01)，模型组表达最强(P＜0.01)。联合组Ⅳ型胶原的表达低于苯那普利、缬沙坦两组(P均＜0.05)。
结论:在单侧肾切除1周后静脉注射阿霉素诱导的肾小球硬化模型中，ACEI和AT1RA具有相似的肾脏保护作用，联合应用优于单独应用。
第二部分:ACEI和AT1RA联合应用对肾脏转化生长因子-β1和血小板源性生长因子的影响
目的:探讨苯那普利与缬沙坦联合应用对肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)和血小板源性生长因子(PDGF)影响，为延缓肾小球硬化提供可靠的实验依据和理论基础。
方法:动物实验及分组同上。免疫组化及原位杂交检测肾脏TGF-β1和PDGF-BB的蛋白和mRNA表达。
结果:1.TGF-β1的表达在模型组均明显增加(P＜0.01)，三治疗组较模型组明显减少(P均＜0.01)，联合组与苯那普利、缬沙坦两组之间差异无显著性意义。2.PDGF-BB的蛋白和mRNA的表达在模型组明显强于苯那普利组、缬沙坦组及联合组(P均＜0.01)，缬沙坦、联合组的表达又弱于苯那普利组(P均＜0.05)。
结论:苯那普利和缬沙坦可能部分通过抑制TGF-β1和PDGF-BB在肾脏中的表达来发挥延缓肾小球硬化的作用。联合应用对PDGF-BB的抑制强于苯那普利组，但对TGF-β1的表达和单独治疗组相似。
第三部分:ACEI和AT1RA联合应用对肾小球系膜外基质降解系统的影响
目的:探讨苯那普利与缬沙坦联合应用对肾小球降解系统的影响，为延缓肾小球硬化提供可靠的实验依据和理论基础。
方法:动物实验及分组同上。免疫组化及原位杂交检测肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达。
结果:1.免疫组化结果显示三治疗组PAI-1、MMP-9和TIMP-1在肾脏表达较模型组明显减少(P均＜0.01)，其中PAI-1在联合组的表达弱于苯那普利、缬沙坦两组(P均＜0.05)，MMP-9和TIMP-1分别在联合组的表达弱于苯那普利和缬沙坦组(P均＜0.05)。2.原位杂交结果显示对照组PAI-1和TIMP-1的mRNA主要在肾小管少量表达，模型组的表达量显著增加，三治疗组PAI-1和TIMP-1mRNA的表达明显减少，且联合组的表达显著性低于苯那普利、缬沙坦两组(P均＜0.05)。3.相关性分析PAI-1、TIMP-1吸光光度值与Ⅳ型胶原、肾小球硬化指数及TGF-β1均呈正相关。
结论:在单侧肾切除+阿霉素注射诱导的肾小球硬化大鼠模型中，ACEI与AT1RA通过阻断RAS，降低PAI-1、MMP-9、TIMP-1在肾脏的表达，促进ECM的降解而延缓肾小球硬化的进展，且联合应用优于单用。
第四部分:ACEI和AT1RA联合应用对肾脏细胞凋亡的影响
目的:探讨ACEI和AT1RA联合应用对肾脏细胞凋亡的影响。
方法:动物实验及分组同上。免疫组化法检测肾脏Fas和FasL的表达，TUNEL法检测肾脏细胞凋亡情况。
结果:1.光镜下半定量分析表明苯那普利、缬沙坦、联合组Fas和FasL的表达弱于模型组(P均＜0.01)，尤以联合组明显。2.TUNEL法结果表明模型组肾小球及肾小管细胞凋亡最明显。与模型组相比，苯那普利、缬沙坦、联合组肾小球及肾小管细胞凋亡指数显著降低(P均＜0.01)，而联合组又低与苯那普利、缬沙坦两组(P均＜0.05)。3.肾小球硬化指数与肾小球细胞凋亡指数、肾小管细胞凋亡指数均成正相关
结论ACEI和AT1RA可能部分通过抑制肾脏细胞凋亡来发挥延缓肾小球硬化的作用，联合应用ACEI和AT1RA比单独应用对细胞凋亡的作用更佳。
第五部分:ACEI和AT1RA联合应用对肾脏细胞周期调控的影响
目的:探讨苯那普利和缬沙坦联合应用对肾脏细胞周期调控的影响
方法:动物实验及分组同上。免疫组化法检测肾脏周期素D1和P27的表达。
结果:1.免疫组化染色显示周期素D1在对照组有少量表达，模型组表达最多，苯那普利、缬沙坦、联合组较模型组明显减少(P均＜0.01)，而联合组与苯那普利、缬沙坦组之间无差异(P均＞0.05)。2.P27在对照组最高，模型组最低，苯那普利、缬沙坦、联合组较模型组明显增高(P均＜0.01)，而联合组又高于苯那普利、缬沙坦两组(P均＜0.05)。3.P27与肾小球、肾小管细胞凋亡指数及周期素D1均呈负相关。
结论:苯那普利和缬沙坦也通过细胞周期调控来延缓肾小球硬化，联合应用对P27比单独应用作用大。