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铁皮石斛是一种中药材和兰花。所有兰花都需要真菌来为种子发芽和早期幼苗发育提供无机和有机营养。因此我们推断铁皮石斛内生菌的代谢能力应该强于其他内生菌。本论文主要是对铁皮石斛植物内生真菌黑孢菌(Nugrisoira oryzae)和白耙齿菌(Irpex lacteus)共培养次生代谢产物和活性进行研究。论文内容分为四章:第一章综述了黑孢属(Nigrospora)和白耙齿属(Irpex)的次生代谢产物和生物活性研究进展;及部分青霉属(Penicillium)化合物的抗菌活性进展。第二章主要是目标菌株筛选与实验设计,从云南文山采集的铁皮石斛种子中分离出19株植物内生真菌。并对19株植物内生真菌进行TLC筛选,从中筛选出2株植物内生真菌,分别是菌株1(TPZ-30)、菌株23(TPZ-10-1)。再对这2株内生真菌进行混合培养,通过TLC显色,菌株1(TPZ-30)和菌株23(TPZ-10-1)共培养次生代谢产物化学多样性增加。通过对两株菌株ITS序列测定,TPZ-30为白耙齿菌(Irpex lacteus),TPZ-10-1 为黑孢菌(Nigrosporaoryzae)。第三章主要是对铁皮石斛内生真菌黑孢菌(Nigrospora oryzae)和白耙齿菌(Irpex lacteus)混合液体培养次生代谢产物及生物活性研究,并在混合液体培养物中分离鉴定出 5 个新化合物:nigirpexin A(1*),nigirpexin B(2*),nigirpexin C(3*),nigirpexin D(4*),nigrosirpexin A(5*),以及 9 个已知化合物:dermatolactone(6),tremulenediols A(7),scytalone(8),11,12-dihydroxy-1-tremulen-5-one(9),ergos-terolperoxide(10),conocenol B(11),conocenol C(12),4α,11,12,14-tetrahydroxy-1-tremulene(13),14-ac etoxy-15-hydroxyirpexan(14)。由于分离鉴定的其它化合物量不够,我们只对化合物4*,5*,7做抗菌活性,实验表明,化合物5*,7对内生真菌黑孢菌(Nigrospora oryzaey)有抗菌活性,MICs值为64μg/mL,16μg/mL,对白耙齿菌(Irpexlacteus)有弱的抗菌活性,MICs值都为128μg/mL,对Candida abicans和Bacillussubtilis和没有抗菌活性。化合物4*对内生真菌白耙齿菌(Irpex lacteus)有微弱的抗菌活性,MICs值为256μg/mL,对内生真菌黑孢菌(Nigrospora oryzae)、病原菌Candida albic和 Bacillus subtilis没有抗菌活性。对新化合物1*,5*分别做抗肿瘤细胞毒活性,NO生成抑制,脂肪酶活性抑制,酪氨酸酶活性抑制和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性抑制等活性测试,实验结果表明,只有化合物5*在50μM浓度下对乙酰胆碱酯酶(AChE)有一定抑制活性,抑制率为35.02%。第四章主要是对铁皮石斛内生真菌黑孢菌(Nigrospora oryzae)和白耙齿菌(Irpex lacteus)混合固体培养次生代谢产物及生物活性研究。通过前期的分离与提取,我们对内生真菌黑孢菌(Nigrospora oryzae)和白耙齿菌(Irpex lacteus)进行液体混合培养在培养基(红薯、白山药、芋艿)和时间(7天、10天、14天)上的改性研究。实验表明,培养基和时间的改变对内生真菌次生代谢的影响不大,只是代谢量增加。因此,在此基础上我们对铁皮石斛内生真菌黑孢菌(Nigrosporaoryzae)和白耙齿(Irpex lacteus)进行混合固体培养,并在混合固体培养物中鉴定出6个已知化合物β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside(1),(20S,22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,6β-triol(2),(+)(3S,6R,7R)-tremulene-6,11,12-triol(3),asperamide A(4),4-(4-dihydroxymethylphenoxy)benzaldehyde(5),nigbeauvin A(6)。对化合物5做抗菌活性,实验表明,化合物5对内生真菌黑孢菌(Nigrospora oryzaey)有抗菌活性,MICs值为16 μg/mL,对白耙齿(Irpex larcteus)有弱的抗菌活性,MICs 值为 256μg/mL。