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目的:以菲牛蛭活体中提取的天然水蛭素（100AT-U/g）为研究对象,检测其抗氧化活性,结合配方设计理论研制成天然水蛭素乳液和眼霜,并探讨其抗衰老、改善眼部微循环等功效及机理,为其在化妆品领域的应用提供思路和实验参考。方法:1.采用Vit C阳性对照法,分别测定天然水蛭素清除DPPH·、·OH、·O2-的能力,分析其抗氧化活性。2.采用感官评价,高低温循环试验、离心试验、p H值和粘度等理化性能测试以及微生物挑战试验等方法评估乳液和眼霜,分析得到各体系的复配关系及天然水蛭素的添加量。3.采用模糊综合评判法评价乳液多因素正交试验和单因素试验结果,分析工艺条件对乳化效果的影响。4.采用客观仪器评估法,试验组为含3%天然水蛭素乳液、空白组为配方基质乳液,测量受试者使用乳液4h前后和28d前后MMV值和TEWL值的变化情况,评价天然水蛭素保湿抗皱功效。5.采用受试者自我评估法,将受试者随机分为两组:试验组和对照组,各20人,试验期间分别使用含3%天然水蛭素眼霜和含3%Vit C眼霜。试验周期为60天,采用问卷调查方式,让受试者对眼部细纹、皮肤平滑感、黑眼圈、浮肿4个指标进行自我评估,计算有效率。对比分析天然水蛭素与Vit C的实际应用效果。6.采用人体试验评估法,选取1名受试者的右眼为试验组,左眼为对照组,试验期间分别使用含3%天然水蛭素眼霜和市售某知名品牌同类眼霜。分别于0、10、20、30、40、50、60天测量眼袋大小,对比黑眼圈的深浅程度和眼部细纹减少量,同时采集使用前后的眼周照片。对比评价天然水蛭素抗衰老和改善微循环功效,并分析其作用机理。结果:1.天然水蛭素清除DPPH·、·OH和·O2-的IC50值分别为14.1mg/m L;4.2mg/m L;21.1 mg/m L(对照Vit C的IC50值分别为2.6μg/m L;0.43mg/m L;0.032mg/m L)。其抗氧化活性总体低于对照Vit C,其清除DPPH·和·O2-的能力均较Vit C低,但其清除·OH能力强,仅是极强Vit C的1/10倍。2.乳液各体系的用量配比关系:乳化体系选用大豆卵磷脂（1.0%）与赛比克-Montanov L（1.5%）;增稠体系选用小核菌胶（0.1%）与卡波940-精氨酸（0.2%）;防腐体系选用山梨酸钾（0.2%）与1,2己二醇（0.5%）;天然水蛭素的添加量不宜超过4.0%。眼霜增稠体系选用卡波940（0.30%）与精氨酸（0.30%）;防腐体系为馨酰酮（0.50%）与己二醇（0.50%）;天然水蛭素添加量为3.0%。该眼霜通过了防腐挑战试验,稳定性佳,感官评价（双盲）的8项指标均好。3.正交试验结果表明,影响乳液配方体系的因素依次为:均质时间>均质速度>乳化温度。结合均质时间的单因素试验,确定乳液最优工艺条件:乳化温度80℃,均质速度4000r/min,均质时间5min。4.空白对照组结果:试验组与空白组在4h内的MMV增长率和TEWL流失率的变化趋势基本一致,两者保湿性能在短时间内无显著差异。试验组在28d前后的MMV增长率为36.59%,明显高于对照组;TEWL流失率为-21.69%,明显低于对照组,表明天然水蛭素有长效的保湿性能,有抗氧化效果。5.Vit C对照组结果:相同添加量下,试验组减少眼部细纹、皮肤平滑感、改善黑眼圈、改善浮肿效果4个指标的有效率分别为65.0%、80.0%、45.0%、40.0%;Vit C对照组分别为35.0%、60.0%、15.0%、5.0%,试验组的抗衰老和改善微循环效果显著好于对照组,也说明了天然水蛭素抗氧化功效的在体应用效果较Vit C突出。6.市售对照组结果:试验组改善眼袋浮肿和减少细纹的效果明显优于对照组;两者均有改善黑眼圈的效果且差异不大。验证了天然水蛭素具有改善眼部微循环和抗衰老的功效,且与同类产品比较有一定优势。结论:1.天然水蛭素在单一反应体系上的抗氧化活性较Vit C差。2.天然水蛭素在化妆品体系的配伍性好、稳定性佳,但添加量不宜超过4.0%。3.在相同添加量下,天然水蛭素抗氧化功效的在体应用效果优于Vit C,化学法检测结果与在体应用效果存在差异。4.客观仪器评估、受试者自我评估和人体试验评估3个在体法的功效评价结果一致,表明天然水蛭素具有保湿抗皱、抗氧化、抗衰老、改善眼部微循环的功效。