癫痫是神经系统常见的慢性疾病，在中国其患病率为7‰左右。其中约70％～80％的患者经正规的抗癫痫药物治疗可有效控制其发作，然而仍有近20％～30％的癫痫病人经抗癫痫药物的联合治疗后，仍不能有效控制其发作，即所谓的难治性癫痫。　　 颞叶癫痫是常见的一型药物难治性癫痫，约占药物难治性癫痫的60％～80％。通过手术治疗颞叶癫痫可获得满意疗效，其病理改变主要在边缘系统，尤其是海马的病变。颞叶癫痫伴海马硬化是部分性癫痫最常见的类型，约占颞叶癫痫的58％～65％。　　 脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是神经营养因子家族的主要成员之一，具有很强的刺激和促进神经细胞生长分化、维持神经细胞存活和发挥正常功能的作用，是重要的神经元保护因子和维持海马功能不可缺少的多肽物质，其对惊厥后神经元的存活、再生有重要意义。近年来发现它除了参与神经生长分化过程和调节神经突触传递外，在颞叶癫痫发作机制中也发挥着重要的作用。　　 本研究利用颞叶癫痫患者切除的海马组织，观察BDNF和trkB在海马CA3区和齿状回的表达情况，并探讨他们在癫痫发生、发展机制中的作用。　　 第一部分 颞叶癫痫患者海马组织BDNF和trkB的表达　　 目的：探讨BDNF和它的受体trkB在颞叶癫痫患者海马神经元的表达情况。　　 方法：实验组：选取哈尔滨医科大学第一临床医学院神经外科2006年1月～2007年12月手术治疗的40例颞叶癫痫患者，依据MRI结果将颞叶癫痫患者分为海马硬化组(hippocampal sclerosis,HS)和非海马硬化组(non-hippocampal sclerosis,non-HS)，每组采样20例患者。应用免疫组织化学方法和Western-blot半定量分析方法观察BDNF和它的受体trkB的表达和蛋白含量。将HS组和non-HS组患者术中切除的新鲜海马组织，平均分成二等份。一份固定、包埋做HE染色和免疫组织化学分析，分别观察海马结构、细胞形态及病理改变和海马CA3区、齿状回BDNF和trkB的表达；一份储存在-70℃冰箱备用，做Western-blot分析，检测BDNF和trkB蛋白水平表达。对照组：免疫组化对照组10例，选自哈尔滨医科大学神经内科脑库，Western-blot对照组10例，为我院神经外科术中清创的脑组织。　　 结果：(1)免疫组织化学结果：颞叶癫痫患者HS和non-HS组齿状回可见BDNF表达上调，强阳性表达为28％(11/40)，中等程度表达37.5％(15/40)，弱阳性表达33％(13/40)，在CA3区可见相似的结果；trkB在齿状回也可见表达上调，强阳性表达12.5％(5/40)，中等程度表达37.5％(15/40)，弱阳性表达47.5％(19/40)，同样在CA3区也可见类似的表达。在颞叶癫痫组BDNF(P<0.0001)和trkB(P<0.0001)阳性表达与对照组相比较有显著性差异，而在颞叶癫痫HS组和non-HS组间比较，差异不具有显著性(P>0.05)。(2)Western-blot结果：颞叶癫痫HS组和non-HS组在14KDa处可见—BDNF强免疫反应带，在145KDa处可见—trkB强免疫反应带，BDNF和trkB蛋白水平在齿状回和CA3区蛋白水平明显增高，与对照组比较差异具有显著性(P<0.05)，而在颞叶癫痫HS组和non-HS组间比较无明显差异(P>0.05)，与免疫组化结果相符。　　 结论：颞叶癫痫患者BDNF和trkB蛋白水平不仅在海马硬化组表达上调，且在非海马硬化组表达也增高，表明这两种因子水平增高对颞叶癫痫的发生、发展具有重要的意义，海马硬化可能不是BDNF和trkB表达上调的特异性原因。　　 第二部分 VPA下调颞叶癫痫患者海马脑片BDNF和trkB的表达　　 目的：观察丙戊酸钠对颞叶癫痫海马脑片增高的BDNF和trkB表达的影响，探讨BDNF和trkB在癫痫发生、发展机制中的作用。　　 方法：取颞叶癫痫患者术中切除的海马组织，迅速放入人工脑脊液中，持续性通入95％02～5％CO3混合气体，将海马组织制备成400μm海马脑片，浸入0.3mM的丙戊酸钠溶液(valproic acid,VPA)和0.3mM的OA(sodium octanoate)溶液中，于3小时和9小时分别行Western-blot分析，检测BDNF和trkB蛋白表达情况。　　 结果：VPA干预1h，BDNF蛋白水平改变不明显，可能与BDNF的合成需要一定的时间过程有关；VPA干预3h，VPA处理组Western-blot显示BDNF蛋白水平下调，分别为39％(HS)和50％(non-HS)，与无VPA处理组和OA处理组比较，存在显著性差异；9h时BDNF蛋白下降明显，在两组分别为85％(HS)和77％(non-HS)。我们同时检测了trkB的蛋白情况，VPA处理3h时，与无VPA处理组和OA处理组比较，trkB蛋白水平下调，在HS组和non-HS组分别为3.7倍和2.O倍；9h时，trkB蛋白水平迅速下降，两组分别为6.4倍(HS)和5.0倍(non-HS)(P<0.001)，而在HS组和non-HS组间蛋白表达水平没有显著性改变(P=0.15)。　　 结论：颞叶癫痫患者海马神经元，抗癫痫药物干预可降低BDNF和trkB蛋白表达；增高的BDNF和trkB表达水平增加了癫痫的敏感性；增高的BDNF和trkB与海马硬化和非海马硬化无关，而与致痫灶有关。进一步对VPA调节BDNF和trkB机制的了解可能会进一步阐明此类癫痫的发病机制。