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鸡血藤(Millettia reticuiata Benth.)是豆科(Fabaceae)密花豆属(Spatholobus suberectus)植物,中药鸡血藤为豆科植物密花豆(Spatholobus suberectus Dunn)的干燥藤茎。作为一味传统中药,其具有活血补血,调经止痛,舒筋活络等功效。现代药理学研究表明,鸡血藤具有改善血液系统、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、双向调节酪氨酸酶和舒缓心血管的作用,并对免疫调节、保肝护肝、抗炎镇痛、镇静催眠等均具有良好疗效。近年来,随着药用鸡血藤需求量的日趋增加,但正品鸡血藤野生资源量反而呈急剧下降,渐趋紧缺状态,再加上鸡血藤生长慢,人工种植少,这势必会影响我国鸡血藤的用药需求。利用植物组织培养技术来快速繁殖再生植株,对鸡血藤种质资源的保护和扩大鸡血藤的人工栽培规模具有非常重要的推动作用,也为满足药用鸡血藤的市场需求提供了有力保障。本文以人工栽培的药用鸡血藤为材料,开展了愈伤组织诱导、增殖和分化不定芽的研究,对鸡血藤再生植株过程的诸多影响因素进行了筛选,同时对鸡血藤愈伤组织诱导和分化过程中4种内源激素IAA、ABA、ZT、GA3水平进行了检测和分析,并进一步对愈伤组织分化过程中内外源激素的相互效应进行了探讨,以期为鸡血藤优良种质资源的保存和快速繁育以及后续的细胞分子育种提供参考,主要结果如下:1、获得了鸡血藤组织培养外植体的最佳消毒方法。嫩叶无菌处理方法为:75%酒精浸泡20s+0.1%升汞处理5min,该条件下外植体成活率达到91.7%;嫩茎为:75%酒精浸泡10s+0.2%的升汞处理5min,此条件下外植体成活率达到88.3%;嫩根为:75%酒精处理20s+0.1%的升汞处理5min,此条件下嫩根成活率高达95%。2、获得了鸡血藤愈伤组织诱导的最适外植体和培养基。愈伤组织诱导最适外植体为嫩叶,最适培养基为MS+6-BA 0.9 mg/L + NAA 0.5 mg/L+KT 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L,诱导率为88.3%。3、得到愈伤组织增殖的最适培养基为MS+6-BA 0.9 mg/L + NAA 0.5 mg/L+KT 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L,增殖系数达到4.59。4、鸡血藤愈伤组织分化不定芽的最适培养基为:MS+6-BA2.5mg/L + NAA 0.4mg/L+GA31.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L,分化率为88.33%;组培苗最适生根培养基为:1/2MS+ NAA 0.1 mg/L+IBA 0.5mg/L + 琼脂8.0g/L + 蔗糖30g/L,生根率为 81.67%。5、在愈伤组织的诱导阶段,内源IAA始终处于较高水平,并在愈伤组织生长最旺时达最大,而内源ABA、ZT和GA3一直保持在较低水平,IAA/ABA比值对愈伤组织的诱导与生长有着重要的调节作用。6、在愈伤组织分化阶段,内源IAA水平先下降后上升,分化成芽期达到最高,且高于愈伤组织诱导期,介于1.15-1.87μg/g之间;ZT和ABA的含量均呈先升后降趋势,而GA3则一直呈上升趋势;IAA/ABA呈先降后升趋势,对芽的分化与生长有着重要的促进作用;GA3/ABA和ZT/ABA呈先降后升趋势,协同促进鸡血藤愈伤组织不定芽分化。7、对不同分化培养基上生长28d的愈伤组织为材料,测定其内源IAA和ABA水平,发现随着不同外源激素处理分化率的升高,内源ABA水平上升,IAA水平下降,ABA/IAA比值在不断增加,可见内源ABA/IAA比值与鸡血藤愈伤组织分化能力有密切联系。