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目的意义:基于课题组前期基础,本研究从药代动力学、肠吸收角度,考察远志、厚朴及其组分配伍在大鼠不同肠段肠吸收特征及药代动力学参数,拟阐释厚朴缓解远志胃肠动力及毒副作用的科学内涵,为揭示中药“相杀”配伍关系提供参考。本论文运用多学科知识,借助药代动力学方法,从多角度探讨厚朴缓解远志毒副作用机制,为阐释中药“相杀”的配伍关系及减毒机制提供方法与思路,故本研究具有中医药理论特色和新意,具有重要的学术价值和科学意义。方法:①运用大鼠在体单向肠灌流模型,采用重量法校正灌流液体积,通过HPLC-DAD法测定肠灌流液中苷类及酚类成分的质量浓度,并考察吸收部位、助溶剂、抑制剂对受试药物吸收的影响。计算其吸收速率常数(Ka)以及表观吸收系数(Papp)。②采用HPLC-DAD法,测定大鼠灌胃远志、厚朴及其配伍的水煎液、浸膏以及水解产物在不同时间点血中的苷类、酚类成分浓度。运用Winnonlin 6.3药代动力学分析软件,选用非房室模型分别对大鼠的血药浓度-时间数据进行分析处理,得到药代动力学参数,统计分析配伍前后各成分主要药代动力学参数的差异性。结果:(1)在体单向肠灌流大鼠的肠吸收特征及抑制剂影响研究:①建立了单味远志、厚朴及二药配伍的肠灌流分析测定方法。结果显示,单味远志:细叶远志皂苷的Ka、Papp值均呈结肠>空肠>回肠>十二指肠趋势;单味厚朴:和厚朴酚与厚朴酚的Ka、Papp之间均无显著性差异(P>0.05),其Ka值与细叶远志皂苷相似,呈结肠>空肠>回肠>十二指肠趋势。远志与厚朴配伍1:1组中的细叶远志皂苷在结肠、1:2组在空肠、回肠、结肠的Ka、Papp值均显著低于单味远志组(P<0.05);1:2配伍组的和厚朴酚与厚朴酚在回肠的Ka、Papp值均显著高于同等量的单味厚朴组(P<0.05,P<0.01)。②抑制剂对肠吸收的影响结果显示:远志中加入P-gp抑制剂盐酸维拉帕米(VH)中浓度,则能显著增加细叶远志皂苷的Ka值(P<0.05);加入MRP2抑制剂吲哚美辛(IT),与空白组比较Ka无显著性差异(P>0.05)。而厚朴中加入不同浓度的P-gp抑制剂VH和MRP2抑制剂吲哚美辛IT后,与空白组比较Ka、Papp均无显著性差异(P>0.05)。(2)药代动力学研究:①分别建立了厚朴、远志水煎液和浸膏的大鼠血浆中和厚朴酚、厚朴酚及细叶远志皂苷等HPLC-DAD分析方法,分别优选出最佳提取溶剂沉淀蛋白和测定远志各指标性成分的溶剂系统,并分别绘制各成分的血药浓度-时间曲线图。②基于上述分析方法,计算各成分的药代动学参数。结果显示,配伍水解产物组细叶远志皂苷的达峰浓度(Cmax)极显著性小于单味远志水解产物组(P<0.01),达峰时间(Tmax)、清除率(CL/F)均极显著性大于单味远志组(P<0.01),而半衰期(t1/2)之间无显著性差异(P>0.05);配伍浸膏组中的和厚朴酚Tmax极显著性大于单味厚朴浸膏组(P<0.01),而表观分布容积(V/F)、清除率(CL/F)均极显著性小于单味厚朴组(P<0.01);厚朴酚的t1/2、V/F、平均滞留时间(MRT(0～m))显著性大于单味厚朴组(P<0.05,P<0.01),而消除速率常数(Ke)、药时曲线下面积(AUC(0～n))均极显著性小于单味厚朴组(P<0.01)。③不同提取方法药液的毒性:卡方检验结果,远志配伍厚朴水煎液的毒性极显著性低于单味远志(P<0.01);远志配伍厚朴浸膏的毒性显著性低于单味远志(P<0.05)。远志浸膏水解产物配伍厚朴浸膏后全部消除其毒性。远志配伍厚朴药液不同提取方法前后毒性总体分析,远志配伍厚朴后毒性极显著性低于单味远志(P<0.01)。结论:①肠吸收:远志配伍厚朴后远志苷类成分在空肠、回肠以及结肠的吸收明显减少,而厚朴酚类物质在回肠的吸收显著增加,远志配伍厚朴1:2略优于1:1和1:3配比。②抑制剂影响:单味远志所含的细叶远志皂苷受P-gp外排影响,但不受MRP2影响,提示若含细叶远志皂苷制剂与P-gp抑制剂联用,可能会促进其吸收。而单味厚朴所含的和厚朴酚与厚朴酚则不受MRP2和P-gp的影响。③药代动力学:远志苷类与厚朴酚类配伍后,可使和厚朴酚的清除率明显降低,厚朴酚的半衰期显著增加。酚类物质对远志中苷类成分有延迟达峰时间、降低达峰浓度、增加其清除率等作用。④不同提取方法的远志毒性呈浸膏>水煎液>浸膏水解产物趋势;厚朴与远志配伍后可极显著性降低远志的致死率。研究提示,厚朴降低远志毒性及其胃肠副作用的原理,可能与厚朴中的酚类成分抑制远志中苷类成分的吸收,并加速其清除,进而降低其毒副作用,呈现“相杀”减毒的配伍关系。厚朴中的酚类物质可能是发挥缓解远志毒副作用的物质基础。