针灸对环磷酰胺化疗小鼠骨髓造血微环境中SDF-1及LFA-1影响的研究

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目的通过观察针灸对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)所致骨髓抑制模型小鼠骨髓组织中基质细胞衍生因子-l(SDF-1)及淋巴细胞相关抗原-1(LFA-1)含量的影响,从分子生物学水平揭示针灸修复和保护化疗后骨髓造血微环境的作用机理,从而为临床应用针灸保护化疗患者的造血功能,提升外周血白细胞提供分子生物学的实验室依据。方法将80只SPF级雄性昆明种小鼠按治疗天数不同依其体重随机分为3天组和5天组,每组再按其体重随机分成4组:空白组、模型组、针刺组、艾灸组;每亚组各10只。用CTX建立骨髓抑制模型。造模成功后,每天定时专人对针刺组、艾灸组小鼠“大椎”、“膈俞”、“肾俞”、“足三里”给予针刺、艾灸治疗,根据所分组不同,分别连续治疗3或5天。空白组、模型组每日陪同抓取固定,不治疗。各组小鼠每日定时专人尾静脉采血,镜检外周血白细胞计数;酶联免疫吸附试验检测各组小鼠骨髓细胞SDF-1和LFA-1含量,采用SPSS20.0 for Windows统计软件进行数据统计分析。结果1造模后,3天组和5天组接受CTX化疗的各组小鼠与空白组比白细胞数明显下降(P<0.05),提示2组均造模成功。治疗3天后,模型组、针刺组、艾灸组白细胞数均低于空白组(P<0.05)。治疗5天后,模型组白细胞数低于空白组(P<0.05),而针刺组、艾灸组白细胞数均高于模型组和空白组(P<0.05)。模型组造模前白细胞最高,然后呈下降趋势,在治疗3天后白细胞降至最低,然后呈上升趋势。针刺组、艾灸组造模前白细胞最高,然后呈下降趋势,在治疗第2天后白细胞最低,然后呈上升趋势。2造模后,接受CTX化疗的各组小鼠SDF-1含量与空白组比明显下降(P<0.05),提示CTX抑制骨髓趋化因子SDF-1的表达。治疗3天与5天后SDF-1含量变化规律非常相近。与空白组比,模型组、针刺组、艾灸组SDF-1含量有所下降(P<0.05)。但针刺组、艾灸组SDF-1的含量明显高于模型组(P<0.05),针刺组与艾灸组比,艾灸组略高于针刺组但差异无统计学意义(P>0.05)。3造模后,接受CTX化疗的各组小鼠LFA-1含量与空白组比明显升高(P<0.05),提示CTX促进骨髓黏附分子LFA-1的表达。治疗3天后与治疗5天后LFA-1含量变化规律大致相同:与空白组比,模型组、针刺组、艾灸组LFA-1含量有所上升(P<0.05),但针刺组、艾灸组LFA-1含量明显低于模型组(P<0.05)。治疗3天后与治疗5天后两者的差别在于:治疗3天后针刺组与艾灸组比,艾灸组LFA-1略低于针刺组但差异无统计学意义(P>0.05),治疗5天后艾灸组LFA-1低于针刺组且差异有统计学意义(P<0.05)。4治疗天数不同对SDF-1、LFA-1含量的影响。针刺3天或5天对小鼠骨髓中SDF-1、LFA-1含量的影响,差异均无统计学意义(P>0.05)。艾灸3天或5天对小鼠骨髓中SDF-1表达含量的差异亦无统计学意义(P>0.05),但艾灸5天组小鼠骨髓中LFA-1含量低于艾灸3天组小鼠骨髓中LFA-1含量(P<0.05)。结论1针灸治疗可以拮抗CTX化疗所致的骨髓抑制,改善骨髓造血功能,提高外周血白细胞计数。2针刺和艾灸可以通过上调CTX化疗小鼠骨髓中趋化因子SDF-1的表达,增强造血干/祖细胞的趋化作用,调节骨髓中干/祖细胞的迁移,促进早期血细胞的生成和增殖,起到修复化疗后骨髓造血微环境损伤的作用。3针刺和艾灸可以通过下调CTX化疗小鼠骨髓中黏附因子LFA-1的表达,降低造血干细胞与骨髓基质的牢固黏附,促进造血祖细胞增殖和分化,保护骨髓造血微环境,维护化疗后骨髓造血功能。4针刺和艾灸相比,艾灸更有利于通过下调CTX化疗小鼠骨髓中黏附因子LFA-1含量的途径降低造血祖细胞与基质的黏附,拮抗抑制性调节因子对造血祖细胞的损伤。
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