论文部分内容阅读
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,也是全世界与癌症相关死亡的主要原因。目前的临床实践中,乳腺癌被分为四种固有的亚型(Luminal A,Luminal B,Her2-阳性,TNBC性)。一般的治疗手段都有严重的副作用,因此有必要为乳腺癌患者开发低毒新型抗癌药物。脂肪酸代谢在肿瘤细胞存活中具有重要作用,转运脂肪酸的是一类被称为脂肪酸结合蛋白(FABP)的物质。FABP5为FABPs家族的第五个成员,该蛋白在乳腺癌细胞中高度表达,研究发现抑制该蛋白可以有效的降低乳腺癌细胞的活性和肿瘤的发展。SBFI-26是中药角蒿脂碱的类似物,具有抑制FABP5蛋白功能的作用。针对该化合物对于FABP5高表达的乳腺癌是否具有潜在治疗效果以及可能的作用机制,本课题开展如下3方面的工作研究。1.培养乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-468和MDA-MB-231,通过体外细胞实验来评价SBFI-26对其抑制作用。结果显示,各浓度SBFI-26对这三种细胞体外增殖抑制均有效果。经100μmol/L SBFI-26处理24 h后,MCF-7、MDA-MB-468和MDA-MB-231的细胞活性分别下降至54.00+0.81%、58.82+0.034%和46.44+0.054%。在此浓度下,各癌细胞的迁移、侵袭和克隆能力均被明显抑制。2建立MDA-MB-231乳腺癌裸鼠模型,随机分成4组并腹腔给药21天,取出肿瘤和相关脏器进行检测。结果显示,SBFI-26对裸鼠的体重影响不明显,且高低剂量对肿瘤的发展都有一定的抑制作用。H&E染色结果表明药物SBFI-26对裸鼠的主要脏器没有明显损伤。免疫组化结果显示,SBFI-26降低了裸鼠肿瘤中VEGF蛋白的表达。3.通过蛋白免疫印记等实验来探究SBFI-26对FABP5相关通路的影响以及体内抑制肿瘤生长的分子机制。蛋白免疫印记结果表明SBFI-26能降低下游蛋白PPARβ/δ和VEGF的表达。PPARβ/δ激动剂的使用证明了SBFI-26可能是通过抑制FABP5-PPARβ/δ-VEGF通路来抑制乳腺癌细胞的生长。脂肪酸摄取实验结果显示SBFI-26可通过抑制FABP5转运脂肪酸来减少对下游PPARβ/δ信号的刺激,从而减少血管生成因子VEGF的生成,最终导致体内肿瘤的生成和减小。免疫组化结果显示SBFI-26能够在裸鼠体内抑制VEGF的表达,与体外结果一致。结论:SBFI-26在体外能够抑制乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-468和MDA-MB-231的增殖、迁移、侵袭与克隆;在体内能减小肿瘤的生成与发展。根据免疫印迹实验等推测可能是通过抑制FABP5-PPARβ/δ通路减少了VEGF的表达。本研究表明SBFI-26具有潜在治疗乳腺癌效果,为后续药物开发提供了基础数据和参考。