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水疱口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV)能选择性地侵入大多数肿瘤细胞,并迅速复制、杀伤这些肿瘤细胞。在体外培养人鼻咽癌HNE-1细胞株,分别给予浓度梯度的VSV处理。浓度梯度按照每个肿瘤细胞给予不同感染复数(multiplicity of infection,moi)的VSV病毒,即0.1 moi、1moi、10 moi、100 moi组和空白对照共6个组。在倒置显微镜下观察各组肿瘤细胞出现的细胞病变。单核细胞直接细胞毒性测定(MTT reductionassay,MTT)分析VSV处理导致的肿瘤细胞杀伤作用,HO 33258(Hoechst33258)染色荧光显微镜检测VSV诱导体外培养的肿瘤细胞凋亡。用裸鼠BALB/c品系(BALB/c-nude,BALB/c-T淋巴细胞功能缺陷裸小鼠)建立人HNE-1鼻咽癌的BALB/c裸鼠肿瘤模型,研究VSV治疗有无诱导凋亡和抗鼻咽癌肿瘤效应。并统计学分析结果。
我们的实验表明在体外培养人类鼻咽癌HNE-1细胞,VSV处理后,在倒置显微镜下观察到肿瘤细胞出现了细胞病变。MTT实验表明VSV有杀伤肿瘤细胞的作用,并且细胞存活率随VSV的moi增加而减少。HO 33258染色荧光显微镜检测发现VSV能诱导体外培养的肿瘤细胞凋亡。人HNE-1鼻咽癌BALB/c裸鼠肿瘤模型予以VSV治疗,VSV的抗肿瘤效应明显,没有明显的不良反应。治疗组小鼠的残存肿瘤中凋亡细胞明显增多。
目的:通过体外培养观察水疱口炎病毒对人类鼻咽癌HNE-1细胞株的抗肿瘤作用和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。
方法:在体外培养人鼻咽癌HNE-1细胞,实验组分别给予0.1 moi、l moi、10 moi、100 moi的VSV处理和设立空白对照。分别在24小时和48小时于倒置显微镜下观察各组肿瘤细胞出现的细胞病变,MTT实验分析VSV处理导致的肿瘤细胞杀伤作用,HO 33258染色荧光显微镜检测VSV诱导体外培养的肿瘤细胞凋亡。
结果:在体外培养人鼻咽癌HNE-1细胞,给予不同浓度的VSV实验组与空白对照比较,显微镜下实验组肿瘤细胞出现了细胞病变,MTT、实验证实VSV杀伤肿瘤细胞的作用随VSV感染复数增加、作用时间延长而增强。HO 33258染色荧光显微镜检测发现VSV能诱导体外培养的肿瘤细胞凋亡,并且凋亡率随VSV的moi增加而增加。
结论:体外实验的结果表明VSV具有杀伤肿瘤细胞的能力和能一定程度地诱导人鼻咽癌肿瘤HNE-1细胞凋亡。