大豆(Glycine max)因其富含植物蛋白和油脂使其成为了一种重要的油料作物和粮食作物,它不仅是世界上植物蛋白和食用油的主要来源,而且还为工业生产提供了原料,同时也是牲畜家禽的重要饲料来源。故大豆有着重要的经济价值和生产价值。本研究中LePT1基因是从番茄的基因组中克隆获得的,它属于高亲和的磷酸盐转移蛋白Pht1家族基因。它的主要作用在于当植物处于低磷胁迫的环境下,植物依靠高亲和的磷吸收体系从根系周围的环境中吸收磷素以满足自身的生长发育要求。本实验就是以改良大豆品质为目的,将外源LePT1基因转化进入大豆基因组中,以达到能够提高大豆对磷素的吸收利用,进一步提高了大豆的抗逆性,增强其对环境的适应能力的目的。这能够极大的加速大豆品种的改良,获得抗逆、高产的优良大豆新品种,丰富大豆的种质资源。通过设计一对含有Xba I和Kpn I特异酶切位点的特异性扩增引物,对提取的番茄基因组PCR扩增后,将扩增产物与pMD19-Vector连接,然后经与中间载体pROK219和pCAMBLA2300载体的进一步酶切连接,最终构建pCAMBLA2300-LePT1重组载体。本实验以辽宁省主要栽培品种辽豆17作为实验材料,以大豆胚尖为外植体,并以本实验室之前实验人员已摸索确定的针对辽豆17遗传转化的大豆再生体系为基础,采用农杆菌介导法,经过获取胚芽外植体、预培养、侵染培养、共培养、恢复培养、筛选培养和诱导生根等步骤,将LePT1基因导入到大豆基因组中,最终获得转基因苗。经PCR检测,获得第一代成活阳性苗5株,并将获得的种子继续种植获得子二代,对其进行PCR检测并测序,PCR检测结果也呈阳性,同时测序结果经在线比对,结果显示与番茄LePT1基因相似度达到99%。