枳壳促进胃动力化学物质组的筛选及作用机理研究

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目的本研究内容是国家“十一五”重大新药创制专项“名优中药大品种气滞胃痛颗粒技术改造”课题的一部分。非处方药气滞胃痛颗粒(国药准字Z21021522)是治疗胃病疗效确切、社会反响良好的传统中药大品种,其主要成分之一枳壳,是经临床验证治疗肝郁气滞,胸痞胀满,胃脘疼痛。本实验通过体内药效学实验,探讨枳壳的促肠胃动力作用,筛选出促肠胃动力有效物质组,并对其进行初步的作用机理研究。通过有效部位深入细致的研究,为实现中医药理论从药味配伍向化学成分配伍的发展奠定基础。方法1采用高效液相色谱法,进行L9(34)正交试验,对枳壳黄酮类成分提取工艺优选研究。以黄酮类成分柚皮苷为考察指标,选择大孔吸附树脂对枳壳中的有效物质组进行纯化。2采用高效液相色谱法,使用挥发油提取器,对枳壳挥发油成分进行提取。测定挥发油中的柠檬烯含量。3采用半固体糊胃排空法和肠推进法,以枳壳挥发油和黄酮类成分为研究对象,,用不同剂量枳壳组分分别灌胃,观察其对胃肠动力的影响。4采用高效液相色谱法,确定枳壳黄酮类成分柚皮苷和枳壳中柠檬烯的质量控制标准。5采用高效液相色谱法,建立枳壳的指纹图谱分析方法。6采用微波消解电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)技术检测肿瘤治疗中小鼠含药血清中元素含量的变化,并对检测结果进行聚类分析。结果1枳壳中的挥发油和黄酮类成分通过药理实验显示,挥发油和黄酮类成分具有促进胃动力和加速肠蠕动的作用,且挥发油的促进胃动力作用明显强于黄酮类成分,黄酮类成分加速肠蠕动作用强于挥发油类成分。2枳壳挥发油成分中的柠檬烯成分通过半固体糊胃排空法和肠推进法证明,柠檬烯具有较强的促进胃动力作用。枳壳黄酮类成分中的柚皮苷通过半固体糊胃排空法和肠推进法证明,柚皮苷具有较强的加速肠蠕动作用。3以柚皮苷为指标性成分,确定了枳壳黄酮的最佳提取工艺为为A1B3C3,,即用10倍量的90%乙醇提取3次,每次1小时。柚皮苷的含量为7.87%。筛选出了较强的大孔吸附树脂和洗脱溶媒浓度: HPD-400大孔吸附树脂50%乙醇洗脱。枳壳挥发油的提取,使用挥发油提取器,加入适量的水,加热回流,至挥发油含量不再增加。枳壳中挥发油的含量为1.1835 mL·100g-1,挥发油中柠檬烯的含量为76.34%。4使用高效液相色谱法,分别测定十个产地的枳壳药材,建立指纹图谱。5对枳壳各给药组、空白组及阳性对照组血清中的无机元素进行聚类分析,Ca、Al、Ni、Fe四种元素可将各给药组、空白组及阳性对照组区别分类。结论1枳壳挥发油中的柠檬烯为枳壳促进胃排空加速肠蠕动的有效物组分,枳壳黄酮类成分中的柚皮苷为枳壳促进胃排空加速肠蠕动的有效物组分。2体内药效实验证明枳壳中的柠檬烯成分具有良好的促进胃排空加速肠蠕动作用。3体内药效实验证明枳壳中的柚皮苷成分具有良好的促进胃排空加速肠蠕动作用。4枳壳药材指纹图谱的建立。5 Ca、Al、Ni、Fe三种元素在体内的含量变化可能与胃肠消化有关。
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