【摘 要】
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通过Rhodamine B平板筛选,根据荧光圈大小筛选得到二株产脂肪酶能力较强的菌种:细菌Alcaligenes sp和霉菌Penicillium expansum。 在摇瓶条件下对Alcaligenes sp的产酶工艺
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通过Rhodamine B平板筛选,根据荧光圈大小筛选得到二株产脂肪酶能力较强的菌种:细菌Alcaligenes sp和霉菌Penicillium expansum。 在摇瓶条件下对Alcaligenes sp的产酶工艺参数进行了研究,包括碳源和氮源的种类和浓度、营养盐、培养温度、初始pH值、表面活性剂等。在此基础上采用优化后的培养基和培养条件,在3L发酵罐中进行产酶试验,结果表明:通气量和搅拌速度是影响Alcaligenes sp合成脂肪酶的重要因素,其适宜发酵条件分别是0.5vvm、400rpm,发酵液中碱性脂肪酶活力达到225IU/ml。 在摇瓶条件下对Penicillium expansum产酶培养基和产酶条件进行了优化,包括碳源、氮源、培养温度、初始pH值、表明活性剂、摇瓶装液量和转速等。采用优化后的培养基及培养条件,Penicillium expansum的碱性脂肪酶活力可达700IU/ml。3L发酵罐中的放大产酶试验表明,溶氧对Penicillium expansum合成脂肪酶至关重要。 对两种脂肪酶的酶学性质进行了研究:Alcaligenes sp脂肪酶在pH 8.0~10.0范围内稳定,Penicillium expansum脂肪酶在pH 7.0~9.5范围内稳定:两种脂肪酶最适作用pH值均为9.0~9.5,均属于碱性脂肪酶,可用作洗涤剂用酶。Alcaligeties sp脂肪酶在55℃以下较为稳定,最适反应温度为40℃;Penicillium expansum脂肪酶在50℃以下较为稳定,最适反应温度为30~35℃。Ca2+,Mg2+同为两种酶的促进剂;Cu2+和Fe2+同为两种酶的抑制剂:Na+是Penicillium expansum脂肪酶的促进剂,Alcaligenes sp脂肪酶的抑制剂。 微生物碱性脂肪酶具有重要的经济价值,目前对这类酶制剂的生产国内尚属空白。本论文的研究结果在学术上和应用中都具有重要意义。
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