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第一部分NPM1突变基因调控白血病细胞MMPs和Ang水平核仁磷酸蛋白（nucleophosmin，NPM1）基因是急性髓系白血病中发生突变频率最高的基因，其基因突变参与调控白血病的发生和发展。临床上，发生NPM1基因突变的白血病患者多伴有髓外组织器官的浸润。为了深入探讨NPM1突变基因对白血病细胞浸润相关因子水平的调控作用，借助载体PINCO-flag-NPM1mA将NPM1突变A型基因（NPM1mA）转染THP-1白血病细胞，构建稳定表达NPM1mA突变蛋白的单克隆细胞株（THP-1mA），同时设立空载组（PINCO）和未转染组（untreated）作为对照；利用体外侵袭实验分析NPM1突变基因对白血病细胞侵袭力的影响；明胶酶谱法分析基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases，MMPs）MMP-2和MMP-9的活性；qRT-PCR检测血管生成素（angiopoietins）Ang-1和Ang-2mRNA的表达水平。实验结果显示，与对照组比较，NPM1mA组的细胞侵袭力明显增强，MMP-2和MMP-9活性显著性增高，同时，NPM1mA组细胞的Ang-1mRNA水平明显增高，而Ang-2mRNA表达量明显降低。本研究提示，NPM1突变基因可能通过增强MMP-2、MMP-9活性和Ang-1表达以及降低Ang-2mRNA水平等途径，调控白血病细胞外基质降解和血管新生来增强白血病细胞的体外侵袭力。第二部分RAS/MAPK/ERK信号通路在NPM1突变白血病细胞体外侵袭中的作用前期工作发现NPM1突变基因通过MMPs和Ang参与调控白血病细胞的浸润。为了进一步探讨信号转导通路在NPM1突变基因调控白血病细胞浸润的关键作用，采用免疫共沉淀技术分析NPM1突变蛋白和K-RAS蛋白的相互作用；利用RAS下游MAPKs和PI3K相关信号通路相关抑制剂处理THP-1mA细胞，观察阻断信号通路后对细胞侵袭能力的影响；同时，用qRT-PCR检测MMP-2、MMP-9和Ang-1、Ang-2mRNA的表达水平，Western blot和明胶酶谱分别检测MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平及蛋白酶的活性。结果发现，NPM1突变蛋白能与K-RAS蛋白相结合；ERK抑制剂(PD98059，40μM)对THP-1mA细胞的侵袭具有明显的抑制作用（p<0.01），而JNK抑制剂、p38MAPK抑制剂和AKT抑制剂对细胞侵袭力未见显著影响；用ERK抑制剂处理THP-1mA细胞24h后，细胞内MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白表达量明显降低；同时，分泌到胞外的MMP-9的蛋白酶活性也显著下降；此外Ang-1和Ang-2mRNA表达水平增高。结果提示NPM1突变蛋白可通过RAS蛋白结合，主要通过RAS/MAPK/ERK信号通路，上调MMP-2和MMP-9的表达水平和蛋白酶活性，同时抑制Ang-2表达，从而增强白血病的浸润能力。