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背景:近年来,肿瘤靶向药物因特异性强、对正常细胞损伤小等特点,已成为癌症治疗的热点药物。但由于肿瘤组织的异质性,临床应用靶向药物出现了原发和继发耐受现象。这种现象一方面促使人们研发更新型的靶向药物,另一方面,通过药物组合针对多靶点来达到理想的治疗效果。课题组以结直肠癌为研究对象,评估9种结直肠癌细胞对30种靶向药物的敏感性,为原发和获得性耐药细胞株筛选可逆转耐受的药物组合,在细胞及动物水平对其作用进行研究,并分析逆转耐药的分子机制。本文工作主要集中在靶向药物敏感性分析和逆转耐药的体内实验研究。目的:1、分析30种肿瘤靶向药物或抑制剂对9种结直肠癌细胞的敏感性。2、筛选可逆转曲美替尼耐受的药物组合,在动物水平分析该组合对原发和获得性耐受曲美替尼细胞异种移植瘤生长的影响。方法:1、选取9种结直肠癌细胞与30种靶向药物或抑制剂,通过MTT实验测定细胞存活率,计算IC50值进行敏感性分析,敏感标准为IC50值小于等于100nM。将曲美替尼与其余29种靶向药物进行组合筛选,在单药浓度50nM时测定细胞活力。2、分别用原发和获得性耐受曲美替尼的结直肠癌SW480细胞和RKO-R细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,研究联合用药对肿瘤生长的影响,绘制肿瘤生长曲线;对肿瘤组织进行HE染色,采用免疫组化方法检测肿瘤组织中Ki67、Cleaved caspase-3、p-ERK、p-Akt的表达。结果:1、MTT结果显示在9种结直肠癌细胞中敏感药物只有9种,SW480细胞耐受全部30种肿瘤靶向药物或抑制剂。2、药物组合筛选中,SW480细胞株对曲美替尼与GSK2126458组合最为敏感,细胞存活率为17.11%。3、在原发和获得性结直肠癌SW480细胞和RKO-R细胞移植瘤中,与单药组相比,联药组裸鼠移植瘤的生长明显变缓;在曲美替尼与GSK2126458的共同作用下,肿瘤组织中Cleaved caspase-3表达增加,Ki67表达减少、ERK和Akt的磷酸化水平降低。结论:1、9种结直肠癌细胞存在不同程度耐受靶向抑制剂的现象。2、曲美替尼与GSK2126458联合应用可逆转结直肠癌细胞原发和继发曲美替尼耐受的现象。