背景与目的:磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphoinositide 3-kinases,PI3K)家族在机体内发挥着重要的调节作用,如细胞增殖、细胞死亡、细胞分化、细胞迁移等。除此以外,在某些肿瘤组织中可以看到PI3Ks的活性与功能异常。p55PIK作为PI3Ks的一个重要调节亚基,其在机体内的生物学功能尚不完全明确。本研究目的在于构建携带有编码p55PIK基因的腺病毒表达载体,以此为工具探求p55PIK在体内对肿瘤细胞形成肿瘤的情况。方法:以Flag-cmv-p55PIK重组质粒为模板用PCR方法进行基因扩增,将扩增的p55PIK基因构建至穿梭质粒pAdTrack-CMV内,用限制性内切酶PmeI使其线性化,然后转化至含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ5183细菌中,由此获得携带有p55PIK目的基因的重组腺病毒质粒pAd-p55PIK-GFP,经鉴定无误后,用限制性内切酶PacI使其线性化后转染入HEK293A细胞中,并通过绿色荧光观察其在细胞内的包装情况,随后经过3轮大量扩增后,收获带有目的基因的重组腺病毒载体。将扩增后的重组腺病毒感染至SW480结肠癌细胞中,然后将高效表达目的基因的该系肿瘤细胞种植于裸鼠皮下,观察其在体内对形成肿瘤的效果。结果:经酶切鉴定重组腺病毒质粒pAd-p55PIK-GFP构建成功,通过观察其绿色荧光表明其在HEK293A中包装;重组腺病毒Ad-p55PIK-GFP感染入SW480肿瘤细胞后,SW480细胞中p55PIK的表达水平明显增高,感染Ad-p55PIK-GFP的SW480细胞在体内形成的肿瘤体积明显大于空白组和空腺病毒组。结论:重组腺病毒Ad-p55PIK-GFP构建成功,高表达p55PIK蛋白促进肿瘤细胞在体内形成肿瘤。