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【目的】通过对受者环磷酰胺预处理、短程环孢素A应用及供者骨髓细胞、供受者融合后骨髓细胞骨髓腔内输注,观察对移植皮肤存活的影响,进而探索一种适合临床应用的诱导免疫耐受的方法。 【材料与方法】雌、雄性新西兰大白兔各36只,15—20周龄,重2.0-2.5Kg,购自南昌大学医学院动物中心,饲养于南昌大学第一附属医院动物房。雄性作为供者,雌性作为受者,随机配对,将36对大白兔再随机分为6组:即空白对照组、单纯预处理组、单纯骨髓输注组、实验1组、实验2组、无关供体对照组。实验1组应用环磷酰胺100mg/kg/d(-4—-3d)、环孢素A(10mg/kg/d(-1—+10d)+供者造血干细胞骨髓腔内输注组(骨髓单个核细胞4×10~8),实验2组应用环磷酰胺100mg/kg/d(-4—-3d)、环孢素A(10mg/kg/d(-1—+10d)+供、受体融合后骨髓细胞骨髓腔内输注。各组在输注骨髓的同一天进行皮肤移植,观察移植皮肤存活时间、对第三者皮肤的排斥反应及对供体的单向混合淋巴细胞反应,并用多聚酶链反应(PCR)检测Y染色体特有的性别决定基因(SRY)以证实嵌合体的形成。 【结果】(1)单纯骨髓细胞输注组和单纯预处理+环孢素A组在移植后30天均检测不到供受者混合嵌合体,移植皮肤的存活时间分别为11.33±0.82天、16.33±1.21天;联合应用环磷酰胺预处理、短程免疫抑制剂和供者骨髓细胞输注组在移植后30天可检测到供受者混合嵌合体,移植皮肤存活时间为44.67±3.20天;供受者融合细胞输注组移植皮肤存活时间为39.67±1.21天,骨髓移植后30天可检测到嵌合体。实验1组皮肤存活时间(44.67±3.20天)、实验2组(39.67±1.21天)比空白对照组(10.83±0.75天)、单纯预处理组(16.83±1.21)、单纯骨髓输注组(11.33±0.82天)、无关供体对照组(14.83