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目的乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。尽管我国为乳腺癌低发国家,但其发病率却在逐年上升,目前已跃居我国女性恶性肿瘤的首位。寻求高效低毒的抗肿瘤药物及治疗方法一直是科学界研究的热点。蝎毒(scorpion venom, S V)是从蝎尾毒囊腺排放的毒液。本实验所用的蝎毒耐热蛋白(scorpion venom heat-resistant protein, SVHRP)是SV经特殊工艺处理、分离纯化后,得到的一定分子量范围的耐热有效组分,其毒性明显降低、药效明显增强。研究表明,SVHRP对多种肿瘤细胞具有抑制作用。本课题旨在研究SVHRP对体外培养人乳腺癌MCF-7细胞的杀伤作用,并对其作用机制进行探讨,为抗肿瘤药物的开发及SVHRP抗肿瘤的临床应用提供实验依据。方法将处于对数生长期的体外培养人乳腺癌MCF-7细胞以不同浓度的SVHRP处理6、12、24、48 h后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测吸光度(OD)值,计算细胞抑制率,找到对细胞抑制作用最强的SVHRP浓度及作用时间,作为最适浓度进行应用于其他实验,具体为:采用流式细胞仪分析细胞周期改变,免疫细胞化学(SP)法检测细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果1.MTT结果:SVHRP对MCF-7细胞生长有明显的抑制作用,并随着剂量的增加、作用时间的延长,抑制作用逐渐增强。其中以0.1μg/ml的SVHRP作用24 h对MCF-7细胞的生长抑制作用最为显著,生长抑制率为56.4%。2.流式细胞仪检测结果:DNA直方图上加药组G1峰前出现亚二倍体峰(凋亡峰);定量分析示SVHRP组在0.1、0.01μg/ml浓度下细胞凋亡率分别14.18%、11.39%,与未用药对照组6.18%比较差异均有统计学意义(P<0.05);与未用药组比较,SVHRP组处于G1期的细胞减少、处于S期的细胞增加。3.免疫细胞化学结果:0.1、0.01μg/ml的SVHRP作用24 h MCF-7细胞Bcl-2表达阳性率分别为10.64%、35.16%,Bax分别为39.07%、35.15%,对照组分别为Bcl-2:39.10%、Bax:21.21%.结论SVHRP对人乳腺癌细胞株MCF-7存在生长抑制和诱导凋亡的作用,其作用机制可能与下调Bcl-2、上调Bax基因表达有关。